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海洋柴油降解菌性能的优化及其生物载体的研究的中期报告 海洋柴油是一种重要的能源资源，其使用量越来越大，因此重视海洋柴油降解菌的研究具有重要意义。本研究选取海水样品，通过分离筛选得到一株高效降解海洋柴油的菌株。经过16S rDNA序列分析，该菌株属于伪单胞菌属。菌株在3%海洋柴油为唯一碳源的条件下，能够在72小时内将90%的柴油降解。 为提高菌株的降解效率，本研究对该菌株进行了生物载体的研究。选取pET28a载体构建菌株的过表达载体，将目标基因克隆到载体上，用电穿孔法将载体转化到菌株中进行表达。结果表明，该菌株表达的目标基因在菌株的降解效率方面有明显的提高。 为了进一步提高菌株的降解效率，本研究尝试对菌株进行基因编辑，寻找合适的编辑策略。结果表明，CRISPR/Cas9系统能够通过改变目标基因的DNA序列，使得菌株表达的基因功能发生变化。通过CRISPR/Cas9系统对菌株进行基因编辑，成功获得了新的菌株株系，并进一步提高了其降解效率。 综上所述，本研究对海洋柴油降解菌的性能优化及其生物载体的研究，为海洋柴油降解菌的应用提供了有力的基础研究资料。