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干扰物质 1.脂血:吸收光谱300--600nm呈下降趋势 2.Hb:350nm、400nm、540nm、580nm 吸收峰 3.胆红素:300--500nm有吸收峰 可见它们的吸收峰都较宽,且同测定波长有重叠现象。 . * 当前第30页\共有59页\编于星期三\10点 双波长法 双波长测定优点 : ①消除噪音干扰 ②减少杂散光影响 ③减少样品本身光吸收的干扰 . * 当前第31页\共有59页\编于星期三\10点 固定时间法 指在时间-吸光度曲线上选择两个测光点,这两点既非反应初始吸光度亦非终点吸光度,利用这两点吸光度差值计算结果。 如:苦味酸法测肌酐 计算公式: C=(A2-A1)*K A1 A2 · ● T (吸光度) ● . * 当前第32页\共有59页\编于星期三\10点 测定底物的消耗或产物生成的速度的化学方法称为连续监测法(又称动态分析法、速率法或动力学法)。在反应速度恒定期(零级反应期)来连续观察和记录一定反应时间内底物或产物量的变化。通过测定一段时间内吸光度的变化速率( △A/min )来计算待测物的浓度。 酶活性测定如(ALT、AST、ALP、GGT等)常用 连续监测法(速率法) . * 当前第33页\共有59页\编于星期三\10点 酶促反应曲线 . * 当前第34页\共有59页\编于星期三\10点 连续监测法 即零级反应速率法,亦称斜率法 在较长反应时间区段内(90-180秒),每隔一定时间(5~30秒)读取一次吸光度值,至 少读取4点,得到3个以上△A,最后算出 反应速率△A/min。 . * 当前第35页\共有59页\编于星期三\10点 . * 当前第36页\共有59页\编于星期三\10点 酶促反应进程曲线 . * 当前第37页\共有59页\编于星期三\10点 * * A1 T A S+R1 R2 A2 (吸光度) (时间) 连续监测法 A/min=[(A2-A1 )-(空白)]/(t2-t1) t2 t1 . * 当前第38页\共有59页\编于星期三\10点 连续监测法特点 与固定时间法相比,属于即时观测,无需停止酶促反应、不需添加其他呈色试剂,且可将多点的测定结果绘图连线,快速、直观查看酶促反应进程,很容易找到呈直线的线性期,检查到是否偏离零级反应。 . * 当前第39页\共有59页\编于星期三\10点 典型酶联法反应曲线 . * 当前第40页\共有59页\编于星期三\10点 ALT反应曲线 . * 当前第41页\共有59页\编于星期三\10点 AMY反应曲线 . * 当前第42页\共有59页\编于星期三\10点 (优选)生化分析仪检测原理课件 当前第1页\共有59页\编于星期三\10点 全自动生化分析仪 . * 当前第2页\共有59页\编于星期三\10点 生化分析仪 特点 优点 亮点 自动化 机械化的仪器设备模仿 代替手工操作 提高了工作效率 减少了主观误差 灵敏 准确 快速 标准化 . * 当前第3页\共有59页\编于星期三\10点 生化分析仪分类 1 按结构原理分 管道连续流动式 分立式——常用 离心式 干片式——急诊常用 2 按测定速度分 小型 中型 大型 超大型(模块式) 3 按自动化程度分 半自动 全自动 . * 当前第4页\共有59页\编于星期三\10点 2004 ?? ?? ?? 生化分析仪主要构成 加样系统 供排水系统 构成 比色系统 光源 比色杯 单色器 检测器 数据处理系统 样品转盘 试剂仓 取样装置 . * 当前第5页\共有59页\编于星期三\10点 基本原理 临床生化分析仪最常使用的是——分光光度法 分光光度法——是通过测定被测物质在特定波长处或一定波长范围内光的吸收度,对该物质进行定性和定量分析的方法。 . * 当前第6页\共有59页\编于星期三\10点 . * 当前第7页\共有59页\编于星期三\10点 . * 当前第8页\共有59页\编于星期三\10点 Lambert-Beer(朗伯-比尔)定律 当一束平行单色光通过均匀的非散射样品时,样品对光的吸光度与样品的浓度及厚度成正比 A=kcb A---吸光度 k---吸光系数 c---溶液浓度 b---液层厚度 . * 当前第9页\共有59页\编于星期三\10点 吸光系数 定义:吸光物质在单位浓
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