杂交瘤单克隆抗体制备常见问题解答 .pdf

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杂交瘤单克隆抗体制备常见问题解答 1. 小鼠腹腔制备的单克隆抗体为什么不能直接用于人体治疗?要如何才能? 小鼠的单克隆抗体是属于鼠源性的,如果直接用于人体,人的机体免疫会有严重的排斥 反应,从而引起不良反应,甚至死亡,所以非人源化得抗体是不能直接用于人体的.你可以将小 鼠抗体的 FC 段置换成人的,可以逃避掉,但是这样也就会导致抗体杀伤能力减弱,因为 FC 段 不是可以和一些补体之类的结合吗?所以也有弊端。 2. 制备单克隆抗体时,为什么要选用 B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞? 答:因为 B 淋巴细胞具有产生单一抗体的能力,但不能在体外增殖;骨髓瘤细胞是一 种癌细胞,它能在体外培养条件下无限增殖,但不能产生抗体。因此将二者融合,产生杂 交瘤细胞,它会兼有两个亲本细胞的特性。 3. 杂交瘤细胞注射入小鼠体内为了得到单克隆抗体.既然瘤细胞可以无线增殖?难道不 会导致小鼠的死亡? 在把杂交瘤细胞注入小鼠体内前,要提前打入石蜡油或是不完全佐剂的,数量也会增殖, 不会形成实体瘤,可以诱导机体产生腹水。 4. 有关单克隆抗体在单克隆抗体制备实验中,大致过程是将抗原注射到小鼠体内,然后 从小鼠脾脏中获得能够产生抗体的 B 淋巴细胞,然 答:这个 B 淋巴细胞就是效应 B 细胞,书上不是加了限定词么“能产生抗体的”2.LZ 要明确一点,不是只要是融合的细胞,它就一定能表达,可能会因为诸多因素使得融合细胞不 能分泌抗体,这是个复杂的过程.所以这一步是确定融合细胞能够表达(即分泌抗体),才能 投入使用.像基因工程的最后一步,不就是 目的基因的检测与表达么,作用是相同的. 5. 单克隆抗体制备过程中,将某种抗原注入小鼠体内,从小鼠脾脏中只能获得一种产生 抗体的 B 淋巴细胞 这句话肯定是错误的,“只能获得一种产生抗体的 B 淋巴细胞”,脾脏中有很多种 B 淋 巴细胞的,怎么可能只有一种呢 再问 :抗原不是一种吗 ,就只需产生一种抗体呀 再答: 脾 脏中有很多种抗原的,包括以前自身就具有的啊!这是它的脾脏里面的 6. 请问:什么是全人单克隆抗体?与人源单克隆抗体有什么区别? 人单克隆抗体的生产过程和鼠的单抗一样,只是采用认得 B 细胞和人的瘤细胞.全人单 克隆抗体不存在鼠源性异种蛋白的抗原性,不会被人体免疫系统攻击.直接可以用于医疗,很 安全,而人源化的单抗则是制作出鼠的单抗后,利用基因操作手段,置换或者切除单抗基因中 鼠源性的蛋白片断,弱化其在人体内的抗原性,达到疗效. (取得抗体效价高的小鼠外周血 7. 关于小鼠骨髓瘤细胞用骨髓瘤细胞与 B 淋巴细胞融合后形成杂交瘤细胞,注射到小 鼠体内,那么小鼠不会被骨髓瘤细胞毒害吗? 骨髓瘤细胞不是病毒.骨髓瘤细胞是一种癌细胞,他对小鼠造成伤害就是通过不断增殖 造成的.所以最后小鼠会腹水,这时候可以从腹水中提取单克隆抗体.小鼠最终会因为骨髓瘤 细胞过度繁殖死亡.就和患癌症一样,但是小鼠在实验室中有很多,所以实验室还用这个办法 制备单克隆抗体. 8. 杂交瘤细胞在小鼠体内可以存活多久 杂交瘤细胞是由骨髓瘤细胞和 B 淋巴细胞融合而成(单克隆抗体技术学了吧),所以 呢,他可以像肿瘤细胞一样无限增值,也可以像 B 细胞分泌抗体,于是他就会一直存活下去,等 到小鼠死了,体内营养物质被消耗完了,癌细胞不能增值,又到了其 自然寿命的时候(一般癌 细胞我们不谈寿命,癌细胞 9. 单克隆抗体对人体来说是不是抗原 答:因为一种生物的抗体在另一种生物的体内也是一种外来蛋白比如说你选用的单克 隆抗体是由小鼠来源的 B 淋巴细胞所分泌的那么这个单克隆抗体对于人体来说就是抗原, 而对于小鼠来说就是抗体。

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