呼吸系统疾病动物模型.ppt

呼吸系统疾病 动物模型 ; 呼吸系统疾病是一种常见病、多发病，主要病变在气管、支气管、肺部及胸腔，病变轻者多咳嗽、胸痛、呼吸受影响，重者呼吸困难、缺氧，甚至呼吸衰竭而致死。在城市的死亡率占第３位，而在农村则占首位。更应注重的是因为大气污染、吸烟、人口老龄化及其他原因，使国内外的慢性阻塞性肺病（简称慢阻肺，涉及慢性支气管炎、肺气肿、肺心病）、支气管哮喘、肺癌、肺部弥散性间质纤维化，以及肺部感染等疾病的发病率、死亡率有增无减。;咳嗽动物模型 支气管哮喘动物模型 慢性支气管炎模型 肺气肿和肺心病动物模型 肺水肿动物模型 肺纤维化动物模型 肺结核病动物模型 肺硅从容症动物模型;第一节 咳嗽动物模型 ; 咳嗽是呼吸系统多种疾病的常见症状。拟定受试药物的镇咳作用,可采用小鼠氨水或二氧化硫引咳法及豚鼠枸橼酸引咳法两种模型加以拟定, 并与阳性药物进行同步观察。;一、小鼠氨水引咳法 ? [造模原理] 浓氨水是一种较强的化学刺激物，动物吸入氨水气雾后，刺激呼吸道感受器，引起咳嗽。 [动物和主要器材] 成年小鼠,性别不拘。500ml玻璃罩; 空气压缩机(或脚踏风箱)。 ; [操作环节] 1.小鼠置玻璃罩内→空气压缩机以400mmHg恒压将氨水喷入罩内→喷雾5s→统计动物咳嗽潜伏期和2min内咳嗽次数。也可用引起二分之一小鼠咳嗽的喷雾时间(FDT50)为指标。; [模型评价与注意事项] 1.氨水诱发小鼠咳嗽反应变异性较大,可在初筛止咳药时应用。 2.咳嗽潜伏期是指从喷入氨水开始至发生咳嗽所需的时间(秒数)。小鼠咳嗽以腹肌收缩(缩胸)，同步张大嘴为准，有时可有咳嗽声，观察必须仔细，也可用听诊器听咳嗽声。;二、小鼠二氧化硫引咳法 [造模原理] 二氧化硫是一种强的化学刺激物质,动物吸入其气雾后刺激呼吸道感受器,反射性引起咳嗽。无水亚硫酸钠与硫酸反应生成SO2。 ;[操作环节] 用一带侧口的三角烧瓶,侧口经过橡皮管与球囊连接,烧瓶内盛有无水亚硫酸钠,烧瓶塞上装一滴定管,内灌硫酸，打开滴定管的活塞使硫酸滴到亚硫酸钠上，在烧瓶内产生SO2气体，气体储存于球囊内，用血管???夹紧，应用时用注射器吸收4~10ml，注入放置试验小鼠的广口瓶内。 ;; 3.观察药物的止咳作用 小鼠按体重均分3组，给药组灌胃予以受试药，模型组灌胃予以等体积生理盐水，阳性对照药组腹腔注射磷酸可待因30 mg/kg体重。灌胃予以受试药1 h或腹腔注射给药30 min后，将小鼠置于充斥SO2的烧杯内，观察咳嗽潜伏期，按下式计算药物止咳率： 给药组咳嗽潜伏期 药物止咳率（%）＝ ×100% 模型组咳嗽潜伏期; [注意事项] 1.烧杯内SO2的浓度要求在1:50000，该浓度足以引起咳嗽，如浓度过高(如1:10000)易造成动物中毒死亡。 2.试验中SO2产生的多少与试验室温度、无水亚硫酸钠的量关系亲密，故无水亚硫酸钠的称量应精确。;三、豚鼠枸橼酸引咳法 ? [造模原理] 豚鼠吸入枸橼酸溶液喷雾后，刺激呼吸道粘膜感受器，反射性引起咳嗽。 [动物和主要器材] 体重200~250g豚鼠。 2~4L玻璃罩; 空气压缩机。;豚鼠体型短粗而圆，头较大，眼大而圆还明亮，耳圆，上唇分裂，耳朵短小；四肢短，前脚具4趾，后脚3趾，无外尾。 ; [操作环节] 1.将豚鼠置于玻璃干燥器内,用超声雾化器喷入17.5%枸橼酸雾化气5~10s，观察、统计豚鼠咳嗽潜伏期或统计5min内豚鼠的咳嗽次数。 ; [模型评价与注意事项] 1.豚鼠对化学性刺激物很敏感,刺激后能诱发咳嗽,动物轻易得到。二氧化硫引咳法、氨水引咳法和枸橼酸引咳法是研究止咳药的三种常用措施，前两者系用小鼠，费用较低廉，适合于研究止咳药效果的初筛，拟定效果后，再用豚鼠作进一步研究。 ;第二节 支气管哮喘动物模型; 临床上体现为反复发作性喘息、呼气性呼吸困难和胸闷等症状。哮喘是一种常见疾病，全球约有1亿5千万，我国约有1千5百万哮喘病人，已成为严重威胁人类健康的疾病之一。 ; 速发相阶段:肥大细胞是主要效应细胞，致敏抗原与肥大细胞表面IgE抗体结合。当相同抗原再次进入机体后，引起肥大细胞脱颗粒，释放组胺、5-羟色胺等炎症介质，造成支气管痉挛、气管粘膜微血管通透性增长、气管粘膜水肿和粘液分泌亢进。 迟发相反应:特征是大量嗜酸性粒细胞局部浸润。 ;一、过敏性哮喘模型