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家禽精液保存存在的问题及解决措施 20世纪80年代，中国的家庭佣工繁殖技术开始推广应用。随着人工繁殖技术的发展和完善，它解决了自然杂交在水产养殖过程中的受精率低、种蛋污染严重、孵化率低的问题。目前在养鸡、养鸭生产中已经得到普遍应用, 养鹅生产中人工授精技术也在逐渐成熟。精液保存技术是家禽人工授精技术过程中最主要的环节, 精液保存主要包括短期保存和长期保存 (冷冻保存) 。精液的体外保存时间对优良种鸭精液的使用时间和范围有重要影响, 冷冻保存的精液还对种质资源的长期保存有重要意义。 1 先生的短期保存 1.1 鸡精子的保护作用研究 半个多世纪以来, 禽类精液稀释液的研究取得了较大的突破。Lake分析鸡精液成分发现其由不同种化学物质组成, 其中谷氨酸是禽类精浆中最主要的阴离子组份, 并首次配制了一种含有与公鸡输精管内液体相同特性的化学成分的稀释液 (称为Lake氏液) , 在精液保存24小时和48小时后, 受精率分别达到64%和47%;为此提出使用与公鸡输精管内液体渗透压 (-0.6℃冰点压) 相似并含有钾、钠、镁和谷氨酸盐的稀释液, 能增加精子的存活时间。国内学者张兆旺、姚希芳等通过试验也证实了谷氨酸钠对精子有保护作用。张兆旺通过试验证明, 柠檬酸的钠盐和钾盐也有延长精子体外保存寿命的功效。杨保田通过研究发现柠檬酸钠溶液能有效的提高鸡精子的生存指数。能源物质是精子在体外存活不可缺少的部分, 果糖对于提高贮存精液的受精力具有重要作用。苏东顿的研究结果也证明了果糖能提高精液的受精力。黄仁术也通过试验证明果糖的保存效果优于葡糖糖和蔗糖。 稀释液的pH值能影响精子的代谢率和活性, 所以其应接近家禽精液的p H值。张兆旺和刘宗政认为鸡精液稀释液p H值在6.8~7.2之间效果最佳。姚希芳在研究稀释液p H值及渗透压对鸡精液保存效果的影响中指出鸡精液稀释液p H值在6.7~7.2之间对精子的生存最为适宜。李辉认为鸡精子在p H值为5.97~8.33的稀释液中能保持较高受精能力, 受精率最高达到94.2%。 当精子处于低渗环境, 精子细胞得到水分将膨胀, 同时精子的畸形率特别是颈部弯曲将大大增加;当精子处于高渗环境, 精子细胞失去水分将萎缩。张兆旺通过试验表明鸡精液稀释液渗透压应为等渗或接近等渗。禽类精子在渗透压范围250~460m Os M/kg·H2O的情况下能保持精子的活力。姚希芳指出鸡精子生存适宜的渗透压是278~434m Os M/kg·H2O。杨保田通过试验也证实精液稀释液渗透压为等渗时精子活动时间最长。赵建军在研究渗透压对鸡精液低温保存的影响中指出渗透压为300m Os M/kg·H2O时精子存活时间、精子 生存指数 都优于400m Os M/kg·H2O、500mOsM/kg·H2O。 1.2 受精率及保存时间 采集到的家禽精液在输精前对其进行适当的稀释能提高精子的存活时间和能力, 但如果稀释倍数过高, 会造成精子的受精力降低。因此, 在稀释精液时应选择出最佳的稀释倍数进行稀释。胡松庭等用鸡原精液和不同的稀释比例 (1∶1、1∶2、1∶3) 稀释精液, 试验证明用鸡原精液、1∶1和1∶2稀释比例稀释精液输精后, 得到的种蛋受精率差异不显著 (P0.05) 。朱庆用1% Na Cl液作为稀释液, 用鸡原精液与1∶1和1∶2稀释比例稀释组进行受精率对比试验, 试验结果表明鸡原精液与1∶1稀释组的受精率无显著差异, 但其受精率低于1∶2稀释组。彭秀丽认为鸡精液1∶1稀释时种蛋受精率较高。潘越博研究鸡精液稀释比例对种蛋授精率的影响, 试验表明稀释比例1∶1、1∶1.5、1∶2的受精率显著高于原精液。林如龙(2014) 认为在半番鸭生产中按1∶1比例稀释精液可以获得较高的种蛋受精率。 精液短期保存根据温度不同可分为常温保存和低温保存。常温保存一般应用在人工授精过程中精液采集后立即输精的过程, 时间比较短暂, 一般为0.5h, 而低温保存的保存时间一般超过24h。胡善虎通过试验证明鸡精液在30~35℃之间保存并在半个小时内输精效果最为适宜。孙占田采精后把精液分别保存在35℃、37℃、39℃温度下半小时内完成输精, 发现保存温度39℃的受精率最佳。景栋林等通过用不同稀释液稀释鸭精液, 在2~5℃、8~10℃和25℃下保存24h后观察精子活力发现, 鸭精液液态保存的最适宜度为2~5℃。许月英等用0.9%Na Cl和牛奶2倍量稀释鹅精液, 分别在2~5℃、15~25℃、38~39℃和48.5℃温度下保存, 发现牛奶稀释的鹅精液在2~5℃低温条件下保存效果最好。 2 不同冷冻保护剂的添加量 禽类精液的冷冻保存研究开始的比较早, 早在20世纪40年代国外科学家用在-0.6℃条件下冷冻鸡精液30秒后的解冻精液输精, 得到冻精条件下的第一只小鸡。在随