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- 2023-10-08 发布于上海
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超声微泡介导Rb94基因转染HXO-Rb44细胞的实验研究的中期报告
本次实验旨在探究超声微泡介导Rb94基因转染HXO-Rb44细胞的效果,以期为研究基因治疗提供参考。本阶段实验已完成超声微泡的制备、细胞培养及转染操作。
首先,我们成功制备了超声微泡。将两种脂质混合,用水浴加热至50℃,慢慢滴加氟化物溶液,形成透明液体,并在5000转下离心。离心后形成乳白色沉淀,加入磷酸盐缓冲液超声振荡打破,形成超声微泡悬液。
接下来,我们进行了HXO-Rb44细胞的培养。选用PBS洗涤,加入1ml胰酶消化,过筛离心,加入10% FBS培养基,孵育24小时,细胞密度达到80%左右时进行下一步操作。
转染操作分为三组,超声微泡组、脂质体组和对照组。以Lipofectamine 3000为载体,将Rb94基因转染HXO-Rb44细胞。对于超声微泡组和脂质体组,分别将转染液与超声微泡悬液、脂质体混合静置20分钟后进行转染。对照组则直接将转染液加入细胞中。
经过48小时,我们成功检测到Rb94基因在三组中均有表达。而超声微泡组中Rb94基因表达明显高于对照组,并且细胞存活率也比脂质体组高。这表明超声微泡对基因转染过程中的细胞转染效率和细胞存活率起到了促进作用。
总的来说,本阶段实验以超声微泡为介质,成功构建了Rb94基因转染HXO-Rb44细胞模型,并且初步证实了超声微泡对基因转染效率和细胞存活率的促进
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