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肠产毒性大肠埃希菌F4ac菌毛蛋白FaeG亚单位的原核表达及免疫学鉴定的中期报告
本研究利用原核表达系统表达大肠埃希菌F4ac菌毛蛋白FaeG的亚单位,并进行免疫学鉴定。首先,利用序列同源性分析和生物信息学方法,确定了F4ac菌毛蛋白FaeG的亚单位的核酸序列,并设计合成了相应的引物。然后,利用PCR扩增得到了FaeG基因的DNA片段,并进行了酶切和纯化。接着,将FaeG基因的DNA片段克隆到原核表达载体pET28a(+)中,在Escherichia coli BL21(DE3)中进行表达。结果表明,FaeG亚单位可以高效地表达,并且获得了纯化的重组蛋白。
进一步地,在免疫学鉴定中,使用Western blotting技术对得到的FaeG亚单位进行检测。结果表明,FaeG亚单位可以被特异性抗体识别,从而证明了重组蛋白的免疫原性。此外,我们还进行了动物免疫实验,将得到的重组蛋白用于小鼠的免疫接种,并对其进行抗体水平的检测。结果表明,接种后小鼠可以产生高水平的特异性抗体,表明FaeG亚单位可以作为一种潜在的抗原,用于大肠杆菌F4ac感染的预防和治疗。
综上所述,本研究成功地利用原核表达系统表达了F4ac菌毛蛋白FaeG的亚单位,并通过免疫学鉴定证实其免疫原性和潜在的应用价值。
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