Penicilliumsp-1523液态发酵生产柚苷酶及酶的固定化研究的中期报告.docx

Penicilliumsp-1523液态发酵生产柚苷酶及酶的固定化研究的中期报告 中期报告： 一、研究背景 柚苷酶是一种能够水解柚皮苷的酶，广泛应用于食品、医药、化妆品等领域。目前，柚苷酶的主要生产方法是通过微生物发酵生产和酶工程学方法获得。其中，微生物发酵生产的柚苷酶具有生产周期短、生产成本低等优点，因此得到了广泛关注。 本研究选用Penicilliumsp-1523菌株进行液态发酵生产柚苷酶，并通过酶的固定化提高柚苷酶的稳定性和反应效率。 二、研究内容 1.菌株的培养与液态发酵 采用琼脂板筛选的Penicilliumsp-1523菌株进行培养。通过菌粒子量的选优，获得活性较高的菌株。将选好的菌株进行液态发酵，优化不同培养条件下的培养基组成，得到最适合生产柚苷酶的条件。 2.柚苷酶的提取与分离 采用酸性条件（pH3.0）对发酵液进行解聚，得到柚苷酶粗酶液。通过硫酸铵盐析法、DEAE-52离子交换柱层析等纯化柚苷酶，得到纯度较高的柚苷酶。 3.酶的固定化 选用几种不同的固定化载体对柚苷酶进行固定化，比较各载体固定化后柚苷酶的稳定性和反应效率。通过比较，选定最优的固定化载体。 三、研究进展 目前，本研究已完成了Penicilliumsp-1523菌株的筛选、液态发酵及柚苷酶的提取与分离等工作。目前正在进行酶的固定化研究，并已初步得到固定化柚苷酶，正在进行酶的稳定性和反应效率的测试。 四、存在问题及下一步工作 目前，固定化柚苷酶的效率还不够理想，下一步将继续优化固定化条件。同时，还将分析菌株发酵过程中酶的产生机理，以进一步提高柚苷酶的产量和反应效率。