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- 2023-10-12 发布于上海
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EMT相关microRNA在结直肠癌中的表达与功能研究的中期报告
该研究旨在探讨EMT相关microRNA在结直肠癌中的表达和功能,并进一步分析其临床意义。目前已完成实验室部分的工作,以下为中期结果报告:
1. 实验方法
a. 细胞培养:采用SW480和HCT116两种结直肠癌细胞株,采用DMEM培养基,加10% FBS,37℃、5% CO2条件下培养。
b. RNA提取:采用Trizol法提取细胞总RNA。
c. qRT-PCR:使用SYBR Green方法进行qRT-PCR,通过计算Ct值,以β-actin作为内部参照基因,分析目标基因表达量。
d. Western blot:采用标准方法进行Western blot,分析蛋白质表达水平。
2. 实验结果
a. qRT-PCR结果表明,miR-200家族中miR-200a和miR-200c在SW480细胞株中表达水平显著高于HCT116细胞株。同时,miR-21、miR-155、miR-182和miR-183在两种细胞株中均有表达。
b. Western blot结果显示,EMT相关蛋白E-cadherin在SW480中表达下调,而vimentin表达上调;在HCT116中表达相反,提示SW480细胞株表现出EMT特征。
c. 使用miR-200a mimics转染SW480细胞株后,qRT-PCR结果显示miR-200a表达水
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