小麦品种和种质材料茎基腐病抗性鉴定技术规程.pdfVIP

小麦品种和种质材料茎基腐病抗性鉴定技术规程 1. 范围 本文件规定了小麦品种和种质材料抗茎基腐病室内苗期和田间成株期鉴定 的接种体制备、接种方法、室内苗期抗性鉴定、田间成株期抗性鉴定、病情分级 和抗性评价的技术要求。 本文件适用于河北省小麦品种（系）及小麦种质资源等材料对茎基腐病的室 内苗期和田间成株期抗性鉴定。 2. 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 2.1小麦茎基腐病 是主要由假禾谷镰孢菌 （Fusariumpseudograminearum）引起的小麦重要土 传病害，侵染麦苗造成叶鞘变褐腐烂，成株期植株茎秆变褐，田间呈散点型白穗 症状；发病严重时不仅导致小麦减产，且易引起脱氧雪腐镰刀菌烯醇 （DON） 等毒素污染问题。 2.2 分离物 无菌条件下，采用人工培养的方法从植物病健交介组织中分离培养获得的病 原菌。 2.3接种体 能够侵染小麦并引起病害发生显示症状的病原培养物。 2.4 发病率 （普遍率） 发病植物体单元数占调查植株体单元总数的百分率，用以表示发病的普遍程 度。在本文件中，在苗期鉴定时，植物体单元数为植株；在田间成株期鉴定时， 苗期和拔节期调查时，植物体单元数为植株；灌浆期调查时，植物体单元数为主 茎和蘖 （或总茎数）。 1 2.5病情指数 全面考虑发病率与严重度的综合指标。当严重度用分级代表值表示时，病情 指数计算公式：病情指数 （Diseaseindex，DI） 【∑ （病情级值×该级病情株数）】 / 【（病情最高级值×调查总株数）】×100 式中：DI——病情指数；i——病级数 （0-n）；Xi——i 级的单元数；Si——i 级严重度的代表值；Smax——严重度的最高级值。 2.6相对病情指数 因小麦茎基腐病发生情况受到气候条件以及地点的影响，不同年份和地点发 生情况会有很大差异。因此设立相对病情指数来进行校正，以减少试验误差。对 照抗性品种为‘Sunco’或‘石优17’或‘衡观35’；感病对照选用‘陕253’或‘衡5364’。 相对病情指数计算公式如下： 相对病情指数 （Relativediseaseindex，RDI） DI /DI .. iv cv 其中， DI ——对照品种 （Controlvarieties）的病情指数； cv DI ——鉴定品种 （Identificatedvarieties）的病情指数。 iv 2.7 抗性评价 根据采用的技术标准判别寄主植物对特定病害反应程度和抵抗水平的定性 描述。 3 接种体的制备 3.1苗期接种的分生孢子悬浮液制备 将假禾谷镰孢菌 （选择强致病力菌株）置于马铃薯葡萄糖琼脂 （PDA）平板 培养基上活化，待培养基布满菌丝后，从PDA 平板培养基上切取一小块带有菌 丝的培养基，于羧甲基纤维素培养基 （CMC）内25℃黑暗振荡培养72h 后，4 6 层纱布过滤，于显微镜下观察，调节孢子悬浮液浓度至1×10 个/mL，按体积比 2 1000：1 （菌液：吐温20）加入吐温20，混匀，4℃保存，备用。 3.2 成株期接种的麦粒接种体的制备 将普通小麦粒浸泡3h 后，取300g 的麦粒去除水后，装入到聚乙烯塑料袋 （长×宽×高 36cm×10cm×8cm）或500mL 三角瓶中；然后置于灭菌锅中121℃ 灭菌100min，冷却后使用。将装有无菌冷却小麦粒的聚乙烯塑料袋或三角瓶， 置于超净工作台中，表面喷洒75%酒精，打开紫外灯表面消毒20min。将在PDA 平板上（9cm）黑暗、25℃条件下培养4 d 的菌株，用灭菌牙签划成边长为0.5cm 方块或用无菌打孔器打成直径为0.5cm 的菌饼，接入灭菌好的麦粒上，每个聚 乙烯塑料袋或三角瓶接入20 枚菌丝块或菌饼。黑暗、25℃条件下，培养7-10d， 待菌丝长满麦粒表面时，