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本发明提供了一种快速检测鉴定巨菌草酵母双杂交筛库阳性克隆的PCR方法。所述方法需提前对酵母菌落进行破壁，使用无菌枪头挑取单克隆菌落于20μLNAOH溶液（0.2M）中吹打混匀，99℃均质破壁10min，以破壁后的上清液为模板，采用上游引物F：5‑CTATTCGATGATGAAGATACCCC‑3和下游引物R：5‑GTGAACTTGCGGGGTTTTTCAG‑3，进行PCR反应；PCR反应循环设置为：95℃预变性3min；95℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸30s，35个循环；
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 116855628 A
(43)申请公布日 2023.10.10
(21)申请号 202310880620.8
(22)申请日 2023.07.18
(71)申请人 福建农林大学
地址 350002
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