实验 细菌的革兰氏染色.docVIP

实验八、细菌革兰氏染色实验 一、实验目的和内容 目的：1.熟悉油镜的使用与保养。 2.掌握细菌革兰氏染色法的原理及实验操作。 3.了解革兰氏染色实验在细菌分类鉴定上的重要性。 内容：1.学习显微镜（油镜）的使用和保养。 2.学习细菌革兰氏染色实验。 3.用油镜观察枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌染色装片并判断其结果。 二、实验原理 革兰氏染色法是1884年由丹麦病理学家C．Gram所创立的。革兰氏染色法可将所有的细菌区分为革兰氏阳性菌(G+)和革兰氏阴性菌(G-)两大类，是细菌学上最常用的鉴别性染色法。染色前必须先固定细菌，其目的有二：一是杀死细菌，使细胞质凝固，菌体粘附于玻片上；二是增加其对染料的亲和力。常用的有加热和化学固定两种方法。固定时应尽量维持细胞原有形态，防止细胞膨胀或收缩。 三、实验材料和用具 （1）菌种：培养12-16h的苏云金杆菌（Bacillus thuringiensis）或者枯草杆菌（Bacillus subtilis），培养24小时的青枯假单胞杆菌。 （2）染色液和试剂：吕氏碱性美蓝染液(或草酸铵结晶紫染液)，石炭酸复红染液、结晶紫、鲁哥尔碘液、95 %酒精、复染剂（蕃红）、二甲苯、香柏油。 （3）器材：废液缸、洗瓶、载玻片、接种杯、酒精灯、打火机、记号笔、擦镜纸、显微镜。 四、实验步骤： ①涂片：取干净载玻片一块，在载玻片的加一滴蒸馏水，按无菌操作法取菌涂