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禽流感血凝素(HA)基因表达载体的构建及在烟草中的瞬时表达的中期报告 禽流感(H5N1)是一种高度病原性病毒，常见于家禽中，并有可能对人类造成重大威胁。研究禽流感病毒的血凝素(HA)基因表达及其表达载体在植物中的瞬时表达是相关研究领域的热点之一。本研究旨在构建禽流感H5N1病毒HA基因表达载体，并通过烟草体内法瞬时表达。 首先，我们利用PCR方法从禽流感H5N1病毒中扩增了HA基因，并将其克隆到pET-28a(+)载体中，构建了HA基因表达载体。然后，利用PCR方法构建了HA基因表达载体的启动子CaMV 35S和终止子NOS片段，并将其克隆到HA基因表达载体中。最后，将HA基因表达载体转化到土壤杆菌中，经过诱导表达后，获得了表达HA基因的融合蛋白。 在烟草中的瞬时表达方面，我们将HA基因表达载体通过农杆菌介导法在烟草叶片中瞬时表达。通过Western blot和ELISA实验，检测到在烟草中成功表达了HA基因，其表达量约为0.2μg/g干重。毒力检测表明，表达的HA基因在烟草中不会引起病毒毒力。 综上所述，我们成功构建了禽流感H5N1病毒HA基因表达载体，并在烟草中实现了瞬时表达。这为进一步研究禽流感病毒的免疫学防治和疫苗开发提供了基础。