一种基于高通量测序技术的突变体筛选方法.pdfVIP

一种基于高通量测序技术的突变体筛选方法.pdf

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本发明属于突变育种技术领域,具体涉及一种基于高通量测序的突变体筛选方法。将待测突变群体划分为不超过250个杂合或500个纯合个体的检测池,利用野生型DNA对检测池DNA进行3倍以上稀释,获得对应稀释池DNA。对检测池和对应稀释池进行目标片段的相同引物PCR扩增及产物高通量测序,将测序所得序列拼接至野生型参考序列,计算每个位点在检测池和对应稀释池中的变异核苷酸频率(NVF)及两者间的比值。若一个位点处的NVF比值1.5,且其检测池和稀释池中的NVF均大于对应理论NVF值的80%,则该位点存在突变

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 116875670 A (43)申请公布日 2023.10.13 (21)申请号 202310765256.0 (22)申请日 2023.06.27 (71)申请人 南京农

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