细胞破碎技术—机械法破碎细胞（生物分离技术课件）.pptx

任务1.1 机械法破碎细胞学习目标①了解细胞破碎方法的种类和基本原理；掌握酶法破碎方法的选择。重难点重点：了解细胞壁的结构；难点：掌握细胞破碎的技术原理和设备。目录1细胞壁的结构32细胞破碎方法选择依据细胞破碎技术原理及设备过渡细胞壁的结构1胞间质果胶质纤维素微纤丝初生壁半纤维素细胞膜可溶怀蛋白质1.植物的细胞壁植物细胞壁的主要成分是纤维素、半纤维素、果胶质等，另外还有一定量的木质素、脂类聚合物等。1.植物的细胞壁纤维素的结构1.植物的细胞壁“经纬模型”认为：在初生壁中纤维素微纤丝穿过伸展蛋白网络并交织在一起形成网状结构，并悬浮在亲水的果胶－半纤维素胶体中，微纤丝平行于壁平面排列形成初生壁的“经”，而伸展蛋白垂直于壁平面排列形成初生壁的“纬”纤维素微纤丝和伸展蛋白之间并无共价连结，而是通过伸展蛋白环绕微纤丝形成封闭环使之交织在一起。木葡聚糖以氢键与纤维素组分结合形成“门闩”，可能控制着微纤丝在伸展素网络中的滑动植物细胞的破碎首先必须打开这些聚合物之间的连接，或直接切断各种聚合物。相对其他类型细胞壁来说，植物细胞壁是最坚固、最难打开的。1.植物的细胞壁门闩1.植物的细胞壁革兰氏阳性菌与革兰阴性菌的细胞壁2.细菌的细胞壁革兰阳性菌的细胞壁较厚，15~80 mm.其化学预分主要是肽聚糖，占细胞壁物质的40%~95%,形成15~50层的聚合体。此外，还有磷壁酸、多糖和少量蛋白质等。革兰阴性菌的细胞壁较薄，10~15nm,其结构和成分较复杂，由外壁层和内壁层组成。外壁层由脂多糖、磷脂、脂蛋白等复合构成，内壁层是一层薄的肽聚糖，厚1. 5~2. 0nm,仅占细胞壁的10%~20%。革兰阳性菌的细胞壁比革兰阴性菌的细胞壁坚固，较难破碎。2.细菌的细胞壁真菌细胞壁细胞壁组成有很大不同，但大多数霉菌的多糖成分为几丁质和葡聚糖。可分为三层：外层是无定形的B-葡聚糖；中层是糖蛋白，蛋白质网中间填充葡聚糖；内层是几丁质微纤维，夹杂无定形蛋白质。3.真菌的细胞壁几丁质是由数百个N-乙酰葡萄糖胺以β-1, 4-糖苷键连接而成的多聚糖构成。3.真菌的细胞壁过渡细胞破碎技术原理及设备2细胞破碎机理1.机械破碎法1.机械破碎法1.机械破碎法搅拌转速料液流速细胞浓度珠体大小1.机械破碎法1.机械破碎法1.机械破碎法细胞破碎中常用的非机械破碎法有冻结－融化法、渗透压冲击法、有机溶剂法、表面活性剂法、酸碱法、酶溶法等。非机械破碎方法的处理条件一般比较温和，有利于目标物质的高活力释放回收，但这些方法破碎效率较低，产物释放速度较慢，处理时间较长，多局限于实验室规模的小批量应用。2.非机械破碎法2.非机械破碎法2.非机械破碎法2.非机械破碎法2.非机械破碎法过渡细胞破碎方法选择依据31.细胞的处理量2.细胞壁的强度和结构3.目标产物对破碎条件的敏感性