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- 2023-10-26 发布于上海
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耐辐射奇球菌抗辐射相关ncRNA的筛选验证和功能研究的中期报告
本项目旨在筛选出耐辐射奇球菌中与抗辐射相关的非编码RNA(ncRNA),并鉴定其在细胞的功能。目前已完成了该项目的中期报告,以下是报告的主要内容:
1. 实验设计
本项目分为两个阶段:初筛和深度筛选。在初筛阶段,我们通过高通量测序技术对耐辐射奇球菌中的ncRNA进行了筛选,得到了一组候选的ncRNA。在深度筛选阶段,我们将利用RNAi技术沉默这些ncRNA的表达,并评估它们对细胞耐受辐射的影响。同时,我们也将利用3末端连接反转录PCR技术扩增出各候选ncRNA的全长,并通过RNA pull-down实验鉴定它们与哪些蛋白质具有相互作用。
2. 进展情况
在初筛阶段,我们成功地分离出了耐辐射奇球菌中的ncRNA,并进行了高通量测序。通过比较分析,共筛选出了一组候选的ncRNA。这些ncRNA的读数覆盖范围广、丰度高、差异显著,表明这些ncRNA可能在耐辐射奇球菌的抗辐射机制中发挥着重要的作用。
在深度筛选阶段,我们已经开始了RNAi沉默试验。我们将分别合成siRNA并转染到耐辐射奇球菌中,以沉默这些ncRNA的表达。同时,我们也正在利用3末端连接反转录PCR技术扩增出各候选ncRNA的全长,并设计引物进行鉴定。目前已经扩增出了一批ncRNA的全长,并准备进行RNA pull-down实验。
3. 下一步计划
在深度筛选阶
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