一种WSB2基因敲除单克隆细胞株的构建方法及其应用.pdfVIP

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2023-11-01 发布于四川
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一种WSB2基因敲除单克隆细胞株的构建方法及其应用.pdf

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本发明公开了一种WSB2基因敲除单克隆细胞株的构建方法及其应用。该方法是采用CRISPR/Cas9系统来制备WSB2基因敲除单克隆细胞株，首先针对WSB2基因设计两个sgRNA序列，利用分子克隆技术构建重组质粒；然后将重组质粒转染至293T细胞进行病毒包装，收集的病毒液转染MDA‑MB‑231细胞，进行嘌呤霉素药物筛选和单克隆化处理，然后提取单克隆细胞株基因组DNA，进行WSB2基因水平测序鉴定，获得WSB2基因敲除MDA‑MB‑231细胞系。本发明构建的WSB2基因敲除MDA‑MB‑231细胞

(19)国家知识产权局 (12)发明专利申请 (10)申请公布号 CN 116970647 A (43)申请公布日 2023.10.31 (21)申请号 202310907221.6 C12N 15/64 (2006.01)