水和废水 总大肠菌群 多管发酵法方法证实.docxVIP

水和废水总大肠菌群的测定 一、项目概述 依据《水和废水检测分析方法》(第四版增补版)水中总大肠菌群的测定多管发 酵法。总大肠菌群系指一群需氧及兼性厌氧的，在37°C生长时能使乳糖发酵，在24小 时内产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌。本方法适用于各种水样(包括底泥)，但操作 较繁，需要时间较长。 二、 实验原理 多管发酵技术是以最可能数(most probable number，简称MPN)来表示试验结果 的。它是根据统计学理论，通过水样不同稀释浓度多组重复生物培养阳性结果估计水体 中被测生物密度的一种方法，具体是通过查MPN表获得结果的。 三、 培养基与试剂 乳糖蛋白胨培养液 蛋白胨10g、牛肉浸膏3g、乳糖5g、氯化钠5g、1.6%漠甲酚紫乙醇溶液1ml、蒸馏水 1000ml 将蛋白胨、牛肉浸膏、乳糖、氯化钠加热溶解于1000ml蒸馏水中，调节PH为7.2-7.4, 再加入1.6%漠甲酚紫乙醇溶液1ml,充分混匀，分装于含有倒置的小玻璃管的试管中，于 高压蒸汽灭菌器中，在115C灭菌20min,贮存于暗处备用。 伊红美蓝培养基 蛋白胨10g、乳糖10g、磷酸氢二钾2.0g、琼脂20g、蒸馏水1000ml、2%伊红水溶液20ml、 0.5%美蓝水溶液13ml 贮备培养基:先将琼脂加至900ml蒸馏水中，加热融化，然后加入磷酸氢二钾及蛋 白胨,混匀使之溶解，再以蒸馏水补足至1000ml