免疫共沉淀(Co-IP)完整版.pptVIP

免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation, CoIP） 免疫沉淀反应（Immunoprecipitation，IP） 免疫沉淀反应主要用于抗原或抗体的定性检测。 其原理是指可溶性抗原与相应抗体在有电解质存在的情况下，按适当比例所形成的可见沉淀现象。 根据此现象设计的沉淀实验主要包括：絮状沉淀实验，环状沉淀实验和凝胶内沉淀实验。 * 是以抗体和抗原之间的专一性作用为基础的用于研究蛋白质相互作用的经典方法。是确定两种蛋白质在完整细胞内生理性相互作用的有效方法。 免疫共沉淀CoIP： CoIP原理 当细胞在非变性条件下被裂解时，完整细胞内存在的许多蛋白质－蛋白质间的相互作用被保留了下来。如果用蛋白质X的抗体免疫沉淀X，那么与X在体内结合的蛋白质Y也能沉淀下来。 * CoIP优点 相互作用的蛋白质都是经翻译后修饰的，处于天然状态； 蛋白的相互作用是在自然状态下进行的，可以避免人为的影响； 可以分离得到天然状态的相互作用蛋白复合物。 CoIP缺点 可能检测不到低亲和力和瞬间的蛋白质－蛋白质相互作用 两种蛋白质的结合可能不是直接结合，而可能有第三者在中间起桥梁作用； 如用western blot检验，必须在实验前预测目的蛋白是什么，以选择最后检测的抗体，若预测不正确，实验就得不到结果。 CoIP流程示意图 Westen Blotting 实验流程 查阅文献，分析可能与哪些未