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基于抗原表位分析的妊娠相关血浆蛋白A的克隆表达及其临床诊断应用研究的中期报告
本研究旨在克隆表达妊娠相关血浆蛋白A(PAPP-A)并开发PAPP-A免疫测定方法,以进行临床诊断应用。目前已完成以下工作:
1. 通过生物信息学分析确定了PAPP-A基因序列,设计合成了PAPP-A基因的进入子和外显子特异性引物。
2. 从人类胎盘组织中提取RNA,用RT-PCR技术扩增得到了PAPP-A基因全长序列,并进行了测序验证。
3. 将PAPP-A基因克隆到表达载体中,转染到CHO细胞中进行表达,并利用西方印迹检测表达效果。
4. 针对PAPP-A进行了蛋白质的定量分析,并成功开发了一种基于PAPP-A的ELISA检测方法。该方法的灵敏度和特异性均较高,可以有效检测妊娠相关血浆中的PAPP-A含量。
下一步,我们将进行更深入的临床研究,收集更多的样本数据,评估该PAPP-A免疫测定方法在妊娠相关疾病诊断中的应用价值。同时,我们也将继续优化该方法,以进一步提高其检测灵敏度和特异性,使其可以更加准确地反映患者的疾病状态。
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