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- 2023-11-19 发布于上海
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IL-15慢病毒表达载体的构建及体外实验的中期报告
IL-15是一种细胞因子,能够促进不同类型的免疫细胞的增殖和活化,包括NK细胞、T细胞和B细胞等,因此具有很多潜在的临床应用价值。为了进一步研究IL-15的作用机制和生物学功能,我们构建了IL-15慢病毒表达载体,并进行了初步的转染实验。
首先,我们设计了包括IL-15基因、荧光蛋白基因(EGFP)以及相关启动子、引物和终止子等在内的表达载体DNA序列。该序列经过PCR扩增和酶切后,将IL-15和EGFP基因克隆到LV5-CMV-GFP-PGK-PURO慢病毒载体中并经过测序验证,成功构建了IL-15慢病毒表达载体。
接下来,我们将该载体转染到了人类小鼠肝细胞株Hepa1-6和小鼠淋巴细胞株EL-4中。结果显示,转染后的细胞表达了高水平的IL-15和EGFP蛋白,并且细胞增殖速度明显增加。进一步研究表明,IL-15的增殖作用主要来源于对NK细胞和CD8+T细胞的作用,可以促进它们的巨噬细胞抗肿瘤活性和免疫记忆能力。
总体来说,我们成功构建了IL-15慢病毒表达载体,并初步证明了它在促进免疫活性方面的潜在作用,为进一步研究IL-15的生物学功能和应用奠定了基础。同时,我们也发现了该载体在肝癌和淋巴瘤等背景下的应用潜力,将继续深入探究其应用价值。
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