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microRNA在糖尿病大鼠视网膜中表达差异谱的研究的开题报告 研究背景和意义： 糖尿病（diabetes）是一种极具社会和健康危害的慢性代谢性疾病，世界卫生组织（WHO）推测到2050年全球可能有6.8亿人患有糖尿病。糖尿病的并发症包括糖尿病视网膜病变（diabetic retinopathy，DR）。DR是糖尿病常见的并发症之一，也是导致暴发盲人的主要病因。DR可分为早期阶段（NPDR）和晚期阶段（PDR），其中晚期DR的病理进程是总体的PDR，包括新生血管（NVE）和新生玻璃体视网膜增生（NVD）等。 microRNA（miRNA）是一类约22个核苷酸长的非编码RNA，广泛参与细胞内的基因表达和调控，并且与各种疾病的发生发展密切相关，包括DR。 本研究旨在通过miRNA高通量测序技术，比较糖尿病大鼠视网膜组织中miRNA的表达差异谱，筛选出DR的特异性miRNA，进一步探讨DR的发病机制，为DR早期诊断和治疗提供理论依据。 研究方法： 1. 建立糖尿病大鼠视网膜病变模型 本实验采用高脂加龙葵素（STZ）注射法建立糖尿病大鼠视网膜病变模型。 2. 提取视网膜组织并RNA净化 在麻醉状态下，离体取大鼠眼球，去除外眼壳和晶状体，将视网膜利用三氯乙酸离心法进行分离和收集，并进行RNA净化。 3. miRNA高通量测序和数据分析 利用Illumina HiSeq 2000测序仪对各组视网膜RNA进行测序，并利用Bowtie2软件进行测序数据的标准化和比对。利用DESeq2软件进行差异表达分析。 预期结果： 1. 建立稳定的糖尿病大鼠视网膜模型，模型中DR特异性miRNA的筛选将具有可靠性和有效性； 2. 初步筛选出DR的特异性miRNA，为DR的发病机制研究和治疗提供理论依据。 研究意义： 该研究将有助于深入探讨糖尿病视网膜病变的发病机制，为DR的早期干预和治疗提供新的思路和突破口。此外，该研究也可为其他相关疾病的诊断和治疗提供参考和借鉴。