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本发明公开了一种高效的细胞系基因敲除方法，涉及基因工程技术领域。本发明高效的细胞系基因敲除方法包括以下步骤：载体构建与质粒制备、细胞转染与药筛、pool基因编辑效率检测、制备单克隆和单克隆基因型鉴定。本发明通过优化载体骨架以及对各个步骤进行优化，能够显著提高片段敲除的效率和缩短基因敲除周期，同时在基因型鉴定中通过PCR凝胶电泳进行阳性克隆初筛，减少测序费用和读取测序结果的精力，解决了现有技术在进行细胞系基因敲除时，存在的基因敲除效率较低、周期长、测序成本高和看测序结果费时费力的问题。
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 CN 117143914 A
(43)申请公布日 2023.12.01
(21)申请号 202310785079.2
(22)申请日 2023.06.29
(71)申请人 广州源井生物科技有限公司
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