柱色谱和薄层色谱分离技术.pptxVIP

□薄层色谱（TCL）

□柱色谱;TLC的作用

跟踪反应进程

为柱层析选择适当的淋洗剂;a/l或b/l

=0.2~0.3;选择适当的展开剂是首要任务.。一般常用溶剂按照极性从小到大的顺序排列大概石油迷己烷苯乙醚

THF乙酸乙酯丙酮乙醇甲醇使用单一溶剂，往;因溶液太稀或样点太小，可重复点样。但应在前次点样的溶剂挥发后，方可重点，以防样点被溶解掉。样点过大，造成拖尾，扩散等现象，影响分离效果;柱子类别

关于柱子的尺寸关于无水无氧柱

叫柱层析分离，也叫柱色谱

关于湿法、干法上样

关于操作问题。;华南理工柱色谱分离实验操作;柱子可以分为：加压，减压，常压;怎么选择柱子类别;减压实例;将活性碳与硅胶按一定的比例混合均匀,干法填充固定相.为了便于观察,在固定相底部装一段石英砂.用水循环真空泵边抽真空边敲打玻璃柱,尽量使固定相压紧并避免空气进入.当分离100mg以下小样品时,柱内径为0.5一

1cm;当分离0.5一19样品时,柱内径为2

一3cm;当分离1一39样品时,柱内径为3一4cm.固定相的高径比一般为7一8,真空度控制在0.1MPa左右.将由电弧法合成的烟良用甲苯提取,提取液过滤、蒸干,再用甲苯溶解,浓度一般以样品/溶剂为1:80一100.将溶液小心均匀滴入固定表面后,将溶剂抽干,加入一定量的甲苯邻二氯苯溶液多次淋洗,可得到纯度大于99.9%的C60。(经高压液相

色谱测定）当紫色的C60淋洗完之后,

将溶剂抽干,为了得到较纯的C70,需改变溶剂的极性梯度,尽量多地使C60洗出(这时洗出的已经不纯).之后,用邻二氯苯(ODCB)淋洗.随着邻二氯苯不断淋洗,C70的纯度逐步提高,最后可得到纯度大于99%的C70;减压柱层析在进行溶剂洗脱时是将溶剂在真空下全部抽出,使固定相“干”后才加入新洗脱剂作下一组分的收集.其原理相当于薄层层析的多次展开,它的分离效果可与薄层层媲美。;加压实例就不一一详举了，下面几个是加压装置改进，应用文献题目;关于柱子的尺寸;关于无水无氧柱;关于湿法、干法上样;溶剂的选择

当然是最便宜，最安全，最环保的了。所以大多选用石油醚，乙酸乙酯。文献中有写用正己烷的，太贵了，除非特别需要不要用不然银子哗哗的，流的比淋洗剂还快，不过因为极性很小，有时还是非它不可。乙醚也可以用，但是就是容易睡觉，注意保持清醒别让溶剂流干了，那样柱子也就不爽了。二氯甲烷也有用的，但是要知道，它和硅胶的吸附是一个放热过程，所以夏天的时候经常会在柱子里产生气泡，天气冷的时候会好一些。甲醇，据说能溶解部分的硅胶，所以产品如果想过元素分析的话要留神，应该经过后继处理，比如说重结晶等。其他的溶剂用的相对较少，要依个人的不同需要选择了。由于某些原因，用到的淋洗剂多是大包装的（便宜嘛），我们这里是用10升或25升的塑料桶装的，就要注意这些工业品的纯度是较低的。经常能够从送来的大桶底部看见有色的杂质，其他的杂质就可想而知了，所以在比较严格的柱分时就要对溶剂重蒸。当然过原料时就可以免去这一步了，反正下面还有提纯的方法。另外溶剂在过柱子后最好也回收使用，一方面环保，另一方面也能节省部分经费，缺点是要消耗一定的人工。这里要注意的是，一般在过柱同时进行的是减压旋蒸，石油醚和乙酸乙酯的比例由于挥发度的不同会导致极性的变化，一般会使得极性变大，在梯度淋洗时比较合适，正好极性越来越大了。在过完柱子后，溶剂最后回收要采用常压，因为在

减压旋蒸时会有部分低沸点的杂质一起出来，常压时就会减少这种现象，如果杂质和你下面要过的样品有反应那就惨了。;样品的收集