物证检验 法医学课件典型实例.pptxVIP

血痕检验

血痕检验需要解决的问题送检检材是否是血痕如果是血痕，是人血还是动物血若是人血，则测定遗传标记进行个人识别 同时进行其他诸如出血量、出血时间及出血部位推断等问题

血痕检验的步骤肉眼检查预试验确证试验种属鉴定 血痕的个人识别（遗传标记测定以及性别鉴定） 其他检验（出血部位、出血量、血痕陈旧度等推断）

肉眼检查肉眼检查主要观察血痕的数量、分布、位置、大小、形状、范围、色泽、它们的相互关系以及它们与现场其他物品的相互关系。目的：推断死亡时间、死亡原因以及案件发生经过等等。

预试验目的：要从大量可疑血痕中筛除不是血痕的检材。 原理：血痕中的血红蛋白或正铁血红素具有过氧化物酶活性，能使过氧化氢分解成水和新生态氧，后者使加入的化学物质氧化成有色物质。 方法：联苯胺试验、酚酞试验、邻联甲苯胺试验、鲁米诺试验、孔雀绿试验、氨基比林试验、愈创木酯试验。性质：筛选试验。 优缺点：灵敏度高、特异性差、假阳性率高、直接破坏检材。

确证试验目的：证明检材是血痕。 原理：检测检材中是否含有血红蛋白或其衍生物。若为阳性结果，则可以认定为血痕。 方法：氯化血红素结晶试验，血色原结晶试验，显微分光镜检查及显微镜下查找血细胞。 优缺点：灵敏度不高；霉菌生长、细菌污染、洗涤、日晒后的血痕，确证试验往往呈阴性反应。

氯化血红素结晶试验原理：血红蛋白正铁血红素氯化血红素结晶氯化钠+醋酸[Cl]+醋酸钠（褐色菱形结晶）

血色原结晶试验原理：[OH-]血红蛋白正铁血红素+变性珠蛋白还原（或吡啶、氨基酸等含氮化合物）血红素血色原结晶

显微分光镜检查原理：有色物质能吸收一定波长的光线，在太阳光谱上出现黑色线条，称为吸收线。血红蛋白及其衍生物是有色物质并且具有很强的选择性吸收光线的性质。

种属鉴定目的：确定血痕是否为人血。 原理：通过检测人的种属特异性指标确证检材为人血。 方法：免疫学方法（沉淀反应、ELISA），生物化学和分子生物学方法（血红蛋白聚丙烯凝胶电泳、人类基因组中种属特异的DNA序列的PCR检测）。 注意：现场提取的检材中非人类的生物性斑痕的干扰。

抗人血清沉淀素血清试验原理及操作步骤：免疫——用人的血清免疫家兔，取兔血清；纯化——用近缘动物血清吸收兔血清，避 免近缘反应；检测——用纯化过的兔血清和检材浸液反 应。注意：建立阳性对照和阴性对照。

抗人血红蛋白沉淀素血清试验原理：免疫——用人血红蛋白免疫家兔，制备兔 抗人血红蛋白血清；检测——用抗血清和检材浸液反应。

血型测定红细胞血型测定ABO血型的测定1、ABO血型抗体测定2、ABO血型抗原测定（吸收试验、解离试验）MN、Rh及其它血型的测定血清型测定红细胞酶型测定白细胞血型（HLA血型）测定

ABO血型抗体的测定方法： 备三份检材，分别滴加0.2%的A、B和O型指示红细胞；37°C保温；观察有无凝集现象。缺点：抗体含量少且容易降解。

吸收试验又称凝集抑制试验。原理：测定加入检材的抗血清效价降低程度。方法：1、备两份检材，分别加入抗A或抗B血清；2、37°C温箱2小时或4°C冰箱过夜；3、离心取上清液；4、分别用生理盐水倍比稀释；5、加1%相应指示红细胞，离心后观察。

解离试验又称吸附洗脱试验。原理：测定与检材结合的抗体的ABO血型。方法：1、备血痕纤维两根，分别加抗A、抗B；2、4°C冰箱1小时；3、漂洗；4、解离——分别加相应指示红细胞悬液，56°C温箱5~10分钟；5、取悬液镜检。

吸收试验和解离试验的比较检材用量实验时间抗体效价指示红细胞浓度操作繁易吸收试验多（1×1cm2）长低﹙＞1：16﹚高﹙2%﹚易解离试验少（2根×1cm）短高﹙＜1：64﹚低﹙0.5%﹚繁

精液（斑）检验

精液的组成固体成分（10%）：精子、睾丸细胞、白细胞、脱落柱状上皮细胞、前列腺卵磷脂小体等；精浆（90%）：1、蛋白质：人血清共有的蛋白：白蛋白……精浆中特有的蛋白：前列腺特异性抗原P30，β-微精蛋白，β-精浆蛋白，α2-精浆糖蛋白；2、酶类：酸性磷酸酶、乳酸脱氢酶；3、精胺、胆碱等其他有机物；4、无机成分：锌等。

新鲜精液检验新鲜精液为乳白色粘稠液，有特殊腥臭味。正常精子呈蝌蚪状。

精斑检验肉眼检查预试验确证试验种属鉴定血型检查

肉眼检查暗色布上呈硬固、灰白色浆糊斑状；白色布上呈黄白色地图状；放大镜观察可见黄白色小鳞片； 紫外线照射可发出特殊的紫白色荧光（可提示有精斑存在）。

预试验碘化碘钾试验酸性磷酸酶试验锌的检出乳酸脱氢酶试验苦味酸结晶试验

碘化碘钾试验褐色针状结晶又称Florence试验。原理：胆碱+Florence试剂缺点：1、灵敏度不高，仅1:400；2、仅在一定时间内可能出现有意义的阳性结果；3、假阳性率高，特异性低。

酸性磷酸酶试验· 原理：酸性磷酸酶[Fe(CN)-]