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本发明公开了一种利用微生物高效制备酮蛋氨酸的方法,属于分子生物技术与酶工程技术领域。本发明的改造方法通过phLAAD的蛋白质改造,通过分析phLAAD产物结合位点周围柔性Loop环结构,突变得到酶活提高至0.564±0.009U/mL,摇瓶发酵α‑酮蛋氨酸产量达到71.08±2.67g/L的突变体I60V/K104R/E243A/A337S,克服了之前野生型酶催化效率低的问题证。本发明对转化体系的催化剂浓度、缓冲液种类、pH和温度行了优化,实现了发酵48h时酮蛋氨酸的产量达到93.15g/L,转
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN117264917A
(43)申请公布日2023.12.22
(21)申请号202311135974.6C12P11/00(2006.01)
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