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戊型肝炎病毒SAAS-JDY5株基因组全长cDNA的构建及其改造的开题报告

1、研究背景和意义

戊型肝炎病毒（HEV）是一种重要的人类病原病毒，是引起急性肝炎的主要病原体，也是全球范围内引起大规模暴发传染病的原因之一。据统计，全球每年约有2000万人感染HEV，其中逝世人数约为20万人。随着HEV基因组序列的逐步明确，对其全长基因组的构建和分析可以更好地帮助人们了解其病毒生物学特性、病毒致病机制等重要的生物学问题，从而更好地预防和治疗相关的临床疾病。因此，建立一种高效、准确的HEV基因组全长cDNA构建技术具有重要的研究价值和应用前景。

2、研究目的

本研究旨在构建一种基于戊型肝炎病毒SAAS-JDY5株的基因组全长cDNA，并对其进行改造，以便更好地探究HEV的生物学特性、病毒致病机制等关键问题，为相关研究提供重要的技术支持。

3、研究内容和方法

（1）基因组全长cDNA构建。将SAAS-JDY5株的病毒RNA提取、逆转录，并根据基因组序列设计合适的引物进行PCR扩增进行全长cDNA构建。如有必要，可利用引物的串联扩增技术来避免构建中的缺失问题。

（2）改造cDNA。为更好地解析HEV的特性和病毒致病机制等关键问题，在构建得到的cDNA上进行一系列改造，如切除非结构蛋白区域，改造启动子、终止子等关键序列。改造后的cDNA将被用于深入分析HEV的生物学特性和致病机制等关键问题。

（3）验证和分析。通过序列分析、体外翻译和基因功能鉴定等方法来验证和分析改造的cDNA的准确性和关键功能。

4、研究意义和创新点

本研究将构建基于HEVSAAS-JDY5株的基因组全长cDNA，并通过改造以获得更深入的分析和探究HEV生物学特性和病毒致病机制的能力。该研究的创新点在于结合引物的串联扩增技术，更为准确地构建病毒基因组全长cDNA，并在其基础上开展改造，以获得更深入的HEV研究。该研究的成果对HEV的相关研究和临床应用具有深远的意义。