细菌鉴定中常用的生理生化反应.ppt

实验原理－－大分子物质代谢实验淀粉水解试验细菌对大分子的淀粉不能直接利用，须靠产生的胞外酶(淀粉酶)将淀粉水解为小分子糊精或进一步水解为葡萄糖(或麦芽糖)，再被细菌吸收利用，细菌水解淀粉的过程可通过底物的变化来证明，即用碘测定不再产生蓝色。实验步骤淀粉水解试验将配制好的淀粉培养基冷却到50℃左右，以无菌操作制成平板。用接种环取少许枯草杆菌划线接种在平板的一边，再取少许大肠杆菌划线接种在平板的另一边。置37℃温箱培养24h。滴加少量卢戈氏碘液于平板上，使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围有无色透明圈出现，说明淀粉已被水解。透明圈的大小，说明该菌水解淀粉能力的大小。甲基红试验:加甲基红指示剂2滴，观察结果，呈现红色者为阳性，呈现黄色者为阴性。伏-普二氏试验:倒掉一半培养液，加入40％KOH5～10滴，然后再加入（总体积）等量的5％?-萘酚溶液，用力振荡，再放入37℃水浴锅中保温15～30min。若培养物呈现红色，为伏－普反应阳性。吲哚试验:加入10-20滴乙醚，振荡数次，静置1－3分钟，沿试管壁滴加2滴吲哚试剂于培养物液面，出现红色者为阳性，出现黄色者为阴性。淀粉水解试验:滴加少量卢戈氏碘液于平板上，使碘液均匀铺满整个平板。如菌苔周围有无色透明圈出现，说明淀粉已被水解。透明圈的大小，说明该菌水解淀粉能力的大小。记录12345678E