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本发明公开了利用腺嘌呤碱基编辑器制备gE、gI和TK三基因缺失PRV毒株的方法与应用，涉及生物技术领域，选择PRV病毒中gE、gI和TK基因的起始密码子作为靶标位点，设计七条sgRNA序列，根据sgRNA序列分别合成单链寡核苷酸，将单链寡核苷酸退火获得带粘性末端的双链DNA片段，将pU6‑sgRNA‑Puro‑2A‑EGFP载体经限制性内切酶酶切后回收片段，再与上述带粘性末端的双链DNA片段连接，获得连接产物，将连接产物转化至感受态细胞中，涂板筛选培养，挑阳性菌扩大培养，对阳性菌液抽提质粒；将质
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN117431222A
(43)申请公布日2024.01.23
(21)申请号202311387432.8C12N15/85(2006.01)
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