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利用腺嘌呤碱基编辑器制备gE和gI双基因缺失PRV毒株的方法及应用.pdfVIP

利用腺嘌呤碱基编辑器制备gE和gI双基因缺失PRV毒株的方法及应用.pdf

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    本发明公开了利用腺嘌呤碱基编辑器制备gE和gI双基因缺失PRV毒株的方法及应用，涉及生物技术领域，选择PRV病毒中gE和gI基因的起始密码子作为靶标位点，设计四条sgRNA序列，根据sgRNA序列分别合成单链寡核苷酸，将单链寡核苷酸退火获得带粘性末端的双链DNA片段，将pU6‑sgRNA‑Puro‑2A‑EGFP载体经限制性内切酶酶切后回收片段，再与上述带粘性末端的双链DNA片段连接，获得连接产物；将连接产物转化至感受态细胞中，涂板筛选培养，挑阳性菌扩大培养，对阳性菌液抽提质粒；将质粒转染至Ve

    (19)国家知识产权局

    (12)发明专利申请

    (10)申请公布号CN117431223A

    (43)申请公布日2024.01.23

    (21)申请号202311387587.1C12N15/85(2006.01)

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