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本发明提供一种利用质粒干涉与CRISPR干涉融合系统快速筛选CRISPR抑制蛋白的方法PICI,首先构建基于pACYC184质粒的外源CRISPR‑Cas9表达系统、基于pBAD24质粒的外源anti‑CRISPR表达系统和基于pRSFduet‑1质粒的pT质粒;通过计算Cas9‑T质粒与Cas9‑NT质粒转化的大肠杆菌菌落形成的单位Cfu的比率计算Acr的抑制活性。本发明的PICI方法用于快速表征Acrs并开发基于Acr的技术,可同时揭示Acrs的抑制活性和作用策略。本发明还建立了PICI‑v
(19)国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号CN117431264A
(43)申请公布日2024.01.23
(21)申请号202311328707.0C12Q1/10(2006.01)
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