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化妆品中利多卡因等7种物质的检测方法

范围

本方法规定了高效液相色谱法测定化妆品中普鲁卡因胺、普鲁卡因、氯普鲁卡因、苯佐卡因、利多卡因、丁卡因、辛可卡因的含量。

本方法适用于皮肤用单元中液态水基类、液态油基类、膏霜乳液类、凝胶类等化妆品中普鲁卡因胺、普鲁卡因、氯普鲁卡因、苯佐卡因、利多卡因、丁卡因、辛可卡因含量的测定。

方法提要

样品处理后，经高效液相色谱仪分离，二极管阵列检测器检测，根据保留时间和紫外光谱图定性，峰面积定量，以标准曲线法计算含量，对于测定过程中有阳性结果的样品，采用液相色谱-质谱法确认。

本方法中各物质的检出限、定量限及取样量为0.5g 时的检出浓度和最低定量浓度见表1。

表1 各物质的检出限、定量下限、检出浓度和最低定量浓度

名称

检出限（ng）

定量下限（ng）

检出浓度(μg/g)

最低定量浓度(μg/g)

普鲁卡因胺

10

25

40

100

普鲁卡因

8

20

32

80

氯普鲁卡因

10

25

40

100

苯佐卡因

8

20

32

80

利多卡因

10

25

40

100

丁卡因 10 25 40

辛可卡因 8 20 32

试剂和材料

100

80

除另有规定外，本方法所用试剂均为分析纯或以上规格，水为GB/T6682规定的一级水。

甲醇，色谱纯。

乙腈，色谱纯。

正己烷，色谱纯。

三氯乙酸，优级纯。

甲酸，优级纯。

3.6 磷酸，相对密度=1.685，w（HPO）=85%，优级纯。

3 4

3.7 磷酸氢二钠。

3.8 氨水，优级纯，含量（NH）=25%～28%。

3

混合标准储备溶液：称取普鲁卡因胺、氯普鲁卡因、丁卡因、利多卡因标准品各0.05g（精确到0. 00001g），普鲁卡因、苯佐卡因、辛可卡因

标准品各0.04（g 精确到0.00001g）置于同一50mL容量瓶中，加甲醇（3.1）

使溶解并定容至刻度，摇匀。

流动相的配制：

流动相A：0.01moL/LNa

2

HPO

4

水溶液，HPO

3 4

调pH值至7.0

流动相B：甲醇4 仪器和设备

4.1 高效液相色谱仪，二极管阵列检测器。

4.2 天平，感量0.001g，感量0.0001g，感量0.00001g。

超声波清洗仪。

高速离心机。

涡旋混合仪。

pH计：精度0.01。

固相萃取仪。

分析步骤

样品处理

液态水基类、凝胶类

称取样品0.5g（精确到0.0001g）于10mL具塞比色管中，加入甲醇

（3.1）2mL，涡旋30s，用甲醇（3.1）定容至刻度，混匀，超声提取20min，以5000r/min离心5min，取上清液经0.45μm滤膜过滤，滤液作为待测溶液。

膏霜乳液类、液态油基类

膏霜乳液类

称取样品0.5g（精确到0.0001g）于15mL离心管中，加入8mL1%三氯乙酸，2mL乙腈，涡旋1min，5000r/min离心5min，上清液待固相萃取小柱净化。

液态油基类

称取样品0.5g（精确到0.0001g）于15mL离心管中，加入2mL乙腈饱和正己烷溶液（乙腈∶正己烷=1∶1，超声30min后静置2h，取上层溶液），涡旋1min，超声10min，加入8mL1%三氯乙酸，2mL乙腈，涡旋1min，5000r/min离心5min，下清液待固相萃取小柱净化。

净化过程

PCX固相萃取小柱依次用3mL甲醇、5mL1%三氯乙酸进行活化。将待净化的样品清液流经小柱后，用3mL1%甲酸甲醇溶液淋洗小柱，弃去淋洗液，再用10mL的5%氨水甲醇[取5mL氨水（3.8）加甲醇至100mL]洗脱，收集洗脱液，氮气吹干，用甲醇定容至10mL，经0.45μm滤膜过滤，滤液作为待测溶液。

系列浓度基质标准工作溶液制备

液态水基类、凝胶类

称取基质空白0.5g（精确到0.0001g）5份，分别置于10mL具塞比色管中，分别加入混合标准储备溶液0.05mL、0.10mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL，按“5.1.1样品处理”步骤进行前处理，即得。

膏霜乳液类、液态油基类

称取基质空白0.5g（精确到0.0001g）5份，分别置于15mL具塞比色管中，分别加入混合标准储备溶液0.05mL、0.10mL、0.25mL、0.50mL、1.00mL，按“5.1.2 样品处理”步骤进行前处理，即得。

各物质基质标准工作溶液系列浓度见表2。

表2 各物质基质标准工作溶液系列浓度

名称

普鲁卡因胺

普鲁卡因

氯普鲁卡因

苯佐卡因

利多卡因

丁卡因

辛可卡因

系

5

4

5

4

5

5