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小鼠CCR7重组腺病毒转染未成熟树突状细胞的实验研究的中期报告
中期报告：
一、研究背景
CCR7是一种G蛋白偶联七次跨膜的受体，主要参与淋巴细胞和树突状细胞（DC）的迁移和定位。CCR7在DC表达后能够诱导其向淋巴结中心区域迁移，并与MHC-Ⅱ分子结合，从而启动T细胞的免疫应答。因此，CCR7和DC的迁移与定位对于免疫学研究具有重要意义。
二、研究目的
本实验旨在探讨小鼠CCR7重组腺病毒转染未成熟DC所能够引起的免疫应答，验证CCR7在DC迁移和定位过程中的作用。
三、研究方法
1.制备小鼠CCR7重组腺病毒。选择pAd-TrackCMV载体，插入小鼠CCR7cDNA序列，并将重组载体转染至293细胞中，通过腺病毒质粒转染技术得到重组腺病毒。
2.培养并分离小鼠骨髓DC。从小鼠骨髓中分离得到未成熟DC，用不黏附法分离得到纯度较高的DC。
3.转染CCR7重组腺病毒。选取适当浓度的CCR7重组腺病毒转染未成熟DC，通过荧光显微镜观察细胞内表达情况。
4.检测细胞免疫学指标。通过流式细胞术分析重组CCR7腺病毒转染前后DC表面分子的表达情况，如CD80、CD86、MHC-Ⅱ等；检测细胞的细胞因子（如IL-12、TNF-α）分泌水平变化情况。
四、实验进展
已完成以上实验方法中的第1、2步，制备了小鼠CCR7重组腺病毒和分离得到了未成熟DC。目前正在进行第3步实验，即对未成熟DC进行CCR7重组腺病毒转染，观察其表达情况。
五、预期结果
预计CCR7重组腺病毒转染后，未成熟DC会表达CCR7受体，并经CCR7介导定位至淋巴结中心区域，发挥其免疫展示功能，激活T细胞的免疫应答。同时，CCR7转染后，未成熟DC的表面分子与细胞因子水平也将发生变化。
六、结论
本实验是对CCR7在DC迁移和定位过程中的作用进行探究，预期结果将有助于深入理解CCR7在免疫系统中的作用发挥机制，为免疫学研究提供理论基础和实验数据。
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