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一种基于劣势PAM一锅法检测单增李斯特菌的方法及试剂盒.pdfVIP

一种基于劣势PAM一锅法检测单增李斯特菌的方法及试剂盒.pdf

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    本发明提供一种基于劣势PAM一锅法检测单增李斯特菌的方法及试剂盒，所述试剂盒包括CRISPR体系、RPA扩增体系和环状近端报告探针；其中，所述CRISPR体系包括AsCas12aRNP和包含劣势PAM序列的crRNA；所述RPA扩增体系包括RPA颗粒、聚合酶和扩增引物。本发明通过使用劣势PAM序列设计的crRNA，使Cas12a/crRNARNP以较低的亲和力结合底物，降低CRISPR体系初始切割能力，从而较慢地进行CRISPR切割反应，使反应进程偏向等温扩增，可以快速依靠预扩增产生远多于经

    (19)国家知识产权局

    (12)发明专利申请

    (10)申请公布号CN117568514A

    (43)申请公布日2024.02.20

    (21)申请号202311614309.5

    (22)申请日2023.11.29

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