UE-P2060用户使用说明书手册.pdfVIP

产品说明书

PMAqPCR活菌检测试剂盒–E.coli(uidA)

产品货号：P2060S,P2060

产品规格：20T,200T

产品内容：

规格

P2060S(20T)P2060(200T)

组分

PMADye,20mMinHO10μL100μL

2

UniversalSYBRGreenqPCRSupermix（通用型）0.2mL2mL

Primermix（uidA，5μM）

For:5’-CGGTGATATCGTCCACCCAG-3’40μL400μL

Rev:5’-TGGATCGCGAAAACTGTGGA-3’

储存条件

-20℃避光存储。有效期见外包装。

光谱特性

PMA:Ex=464nm;Ex/Em=510/610nm(followingphotolysisandreactionwithDNA/RNA)

产品介绍

PMAqPCR活菌检测试剂盒为检测细菌活性提供有效的手段，本试剂盒提供PMA染料和基于SYBRGreen染料的qPCR

混合液。染料的最佳用量和可处理的样品数量可能因样品类型而异。PMA是一种高亲和性的DNA结合染料，尤其与双链

DNA，该染料本身具有微弱的荧光，但与核酸结合后可以发出更为明亮的荧光。PMA具有细胞膜不可渗透性，因此可选择

性地修饰膜受损的死细胞的DNA。PMA修饰的DNA经蓝光（~464nm）光解后，PMA上的光反应性叠氮基转化为高反应

性氮烯自由基，与DNA结合位点附近的任何烃部分反应形成稳定的共价氮碳键，从而导致永久性DNA修饰。该修饰过程

会使DNA不溶，且在后期的基因组DNA提取过程中与细胞碎片一起丢失。残留在溶液中未结合的PMA，在强光照射下与

水分子反应分解成无交联活性的羟胺化合物，使其不能再共价结合DNA。基于PMA的这一特性，我司将PMA与qPCR技

术相结合，形成一种新的检测方法—PMA-qPCR，用于活细菌的筛选。目前该法已在多种细菌菌株以及酵母、真菌、病毒和

寄生虫中得到验证。

复杂样品的处理，如粪便或土壤，可能会需要优化样品稀释度、染料浓度和光处理时间。稀释样品的处理，如水测试，

可能需要在染料处理前进行过滤或浓缩。

使用方法

1/4本产品仅用于科研UElandyInc.

Tel:0512

Web:www.

使用前注意事项

1.本活菌检测试剂盒根据细胞膜通透性区分死菌和活菌。许多杀死细菌的方法会导致细胞膜受损，因此与本试剂盒兼容。

但有些方法，如紫外线照射，可能不会立即导致细胞膜破裂。因此，在选择本试剂盒之前，需先进行文献检索和预实验确

定本试剂盒是否适用于您选择的细菌类型和杀伤方法。

2.PMA处理完细菌后需要进行光解，以使染料与死细胞DNA共价结合。光解操作可以使用蓝色或白色光源。一般来说，

灯越亮，光解步骤的效率就越高。非LED灯（如卤素灯）可能会加热您的样本并对分析产生负面影响，照射时需要使用冰

块对样品降温处理。

3.样本可以在光解后冷冻保存。若在进行PMA处理光解之前冷冻样本可能会损坏细胞膜并产生假阴性结果。如需在检测之

前冷冻样本，建议先进行预实验。

4.PMA的部分作用机制