新城疫油苗和冻干苗疫苗的生产工艺流程.docx

新城疫冻干疫苗生产工艺流程

1生产用毒种制备

1。1毒种繁殖将毒种用灭菌生理盐水作适当稀释（如10-4或10—5）,尿囊腔内接种10日龄SPF鸡胚，每胚0.1ml。选接种后72~120小时死亡、且病痕明显的鸡胚，分别收获鸡胚液（尿囊液及羊水），装于灭菌容器内。将检验无菌、且对1%鸡红细胞凝集价＞1：640（微量法1：512）的鸡胚液混合，定量分装于安甑中，冷冻保存。注明收获日期，毒种代数等.

1。2毒种鉴定

1.2.1病毒含量按含毒鸡胚液量用灭菌生理盐水作为10倍系列稀释，取10-7、10-8、10—93个稀释度各尿囊腔内接种10日SPF鸡胚5个，每胚0.1ml,置36?37°C继续孵育,48小时以前死亡的鸡胚弃去不计，在48~120小时死亡的鸡胚随时取出，收获鸡胚液，同一稀释度的胚液等量混合，按稀释度分别测定红细胞凝集价，至120小时，取出所有活胚，逐个收获鸡胚液，分别测定红细胞凝集价，凝集价＞1:160（微量法1:128）者判为感染，计算EID50，每0。1ml病毒含量应＞108EID50。

1.2.2纯净应无细菌、霉菌、支原体和外源病毒污染,分别按《无菌检验或纯粹检验标准操作规程》、《支原体检验标准操作规程》、《外源病毒检验标准操作规程》进行。

1。3毒种保存在—15C以下保存，应不超过1年.

1。4毒种继代应不超过3代.

2制苗材料选择选择发育