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《临床生物化学和生物化学检验》实验指导
前言
实验教学作为基础医学教学中的一项重要内容,在培养学生分析问题、解决问题及动手
能力等方面发挥着十分重要的作用。临床生物化学检验实验教学是临床生物化学检验课程的
重要组成部分,本教研室根据中医本科专业的特点,并依据《临床生物化学检验》实验大纲
要求,结合多年的教学实践,组织编写了《临床生物化学和生物化学检验》实验指导。本实
验指导内容共12项实验。每项实验包括实验目的、实验原理、实验内容(材料、方法、结果
分析及注意事项)等项目,同时后附思考题,以供学生独立思考、加深理解。
实验学时:48学时
实验一基本操作
(综合性实验,4学时)
【实验目的】
1.掌握移液管、微量加样器正确使用方法。
2.掌握721分光光度计的正确使用方法及简单维护
3.熟悉试验结束后试管、移液管的清洗方式
【实验仪器、器材与试剂】
1.实验仪器和器材:721分光光度计、玻璃试管、微量加样器、移液管、试管架、洗耳
球、记号笔等。
2.实验试剂:蒸馏水、生理盐水等。
【实验项目、方法与步骤】
1、微量移液器使用
(1)根据取用溶液体积选用适当量程的微量移液器
a)P202~20
b)P20021~200
c)P1000201~1,000
(2)容量设定
1
从大值调整到小值时,刚好即可。
从小值调整到大值时,需要调超过三分之一圈后再返回,这是因为计数器里面有一定的
空隙,需要弥补。
不要将按钮旋出量程,这将导致移液器损坏。
(3)吸液头安装
正确的安装方法是:把白套筒顶端插入吸液头,在轻轻用力下压的同时,把移液器按逆
时针方向旋转180度。
切记用力不能过猛,更不能采取剁吸液头的方法来进行安装,那样做会对移液器造成不
必要的损伤。
(4)预洗吸液头
安装了新的吸液头或增大了容量值以后,应把需要转移的液体吸取、排放两到三次。这
样做是为了让吸液头内壁形成一道同质液膜,确保移液工作的精度和准度,使移液过程
具有重现性。
(5)吸液
先将移液器排放按钮按至第一停点,再将吸液头垂直浸入液面。尽量避免吸液头浸入液
面过深,以免液压对吸液的精确度造成影响。同时可以避免在吸取粘稠液体时在吸液头
表面粘上液体影响吸取精度。
(6)排液
排液时,吸液头紧贴容器壁,先将排放按钮按至第一停点,略作停顿以后,再按至第二
停点,这样做可以确保吸液头内无残留液体。
(7)卸掉吸液头
一般用力下按吸液头推出器即可卸掉吸液头。
如吸液头安装过紧,则可用手卸除。
将吸液头丢弃到合适的废物收集器中。
(8)如不使用,将移液器调到最大量程。
2、移液管的使用规范
(1)移取溶液前,应先用滤纸将移液管末端内外的水吸干,然后用欲移取的溶液涮洗
管壁2至3次,以确保所移取溶液的浓度不变。
(2)然后以右手拇指及中指捏住管颈标线以上的地方,将移液管插入供试品溶液液面
下约1cm,不应伸入太多,以免管尖外壁粘有溶液过多,也不应伸入太少,以免液面下
2
降后而吸空。
(3)这时,左手拿橡皮吸球(一般用60ml洗耳球)轻轻将溶液吸上,眼睛注意正在上
升的液面位置,移液管应随容器内液面下降而下降,当液面上升到刻度标线以上约1cm
时,迅速用右手食指堵住管口,取出移液管,用滤纸条拭干移液管下端外壁,并使与地
面垂直,稍微松开右手食指,使液面缓缓下降,此时视线应平视标线,直到弯月面与标
线相切,立即按紧食指,使液体不再流出,并使出口尖端接触容器外壁,以除去尖端外
残留溶液
3、721分光光度计使用方法
(1)检查仪器各调节钮的起始位置是否正确,接通电源开关,打开样品室暗箱盖,使
电表指针处于“0”位,预热20min后,再选择须用的单色光波长和相应的放大灵敏度档,
用调“0”电位器调整电表为T=0%。
(2)盖上样品室盖使光电管受光,推动试样架拉手,使参比溶液池(溶液装入4/5高
度,置第一格)置于光路上,调节100%透射比调节器,使电表指针指T=100%。
(3)重复进行打开样品室盖,调0,盖
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