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关于实验血清甘油三酯含量测定第1页,课件共8页,创作于2023年2月实验目的了解血清甘油三酯含量测定的正常值与临床意义掌握血清甘油三酯化学法测定的基本原理及主要技术方法第2页,课件共8页,创作于2023年2月甘油三酯KOH60-70℃20min钾皂甘油++HIO4+NH4+甲醛乙酰丙酮3,5-二乙酰-1,4二氢-2,6二甲基吡啶(黄色带荧光)甘油甲醛皂化氧化显色32实验原理第3页,课件共8页,创作于2023年2月实验步骤取3(或4)只小试管,依次加入蒸馏水、标准液、样品,抽提剂及硫酸,边加边摇,用力振摇10min,静置10min分层注意:试管必须干燥吸取上层液体0.5ml,加入对应的3(或4)只大试管中,加入异丙醇、皂化试剂,充分混匀,65℃水浴5min注意:吸上层液时,务必当心,绝对不可吸入下层液体(分光光度计预热)加入氧化试剂,充分混匀后,加入乙酰丙酮和氨的混合液,摇匀,65℃水浴15min取出试管,流水/室温冷却,测420nm的吸光度抽提皂化氧化显色比色第4页,课件共8页,创作于2023年2月拉杆,0-4档样品池读数波长毛面1、分清光面、毛面。手应接触毛面,光从光面通过2、用溶液润洗2-3次,装至2/3至4/5体积3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面比色杯的使用分光光度计的使用1.打开电源,调节旋钮至需要的波长,预热20~30min2.1档(空白管),T模式调100%,显示“Blank”、“100”3.拉杆拉至1.5档,T模式调0%,显示“0.00”4.换到A模式,拉至2、3、4档,读取各个样品的吸光度光面第5页,课件共8页,创作于2023年2月Lambert-Beer定律正常参考值为0.30~1.7mmol/Lmg/mlmmol/L国际单位mg/ml—————————×1000摩尔质量g/mol(885)实验结果A1c1m1标准管法——=——=——(终体积相同时)A2c2m2A样品———×m标准品A标准品样品TG浓度=————————V样品A样品———×1mg/ml×0.2mlA标准品=————————————0.2ml第6页,课件共8页,创作于2023年2月
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