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甜菊糖苷提取新方法

丰雪;付娟娟;温辉梁【摘要】以甜叶菊为基本原料，对甜叶菊中的甜菊糖苷的提取工艺条件进行优化，以提高甜菊糖苷的提取率，同时确定纤维素酶对甜菊糖苷提取率的影响.依据单因素和正交试验得出了获得最高甜菊糖苷提取率的条件是:料液比1:10,纤维素酶质量浓度0.2%,提取温度50OC,提取时间90min,溶液pH为5,该条件下的提取率为13.98%,比优化前高出了1.94%.%WithSteviaasthebasicrawmaterial,weoptimizedthesteviosideextractionconditions,forthepurposeofenhancingtheextractionyieldofstevioside,andatthesametime,todeterminetheeffectofcel-lulaseontheextractionyieldofstevioside.Basedonasinglefactorandorthogonaltest,theconditionsa-boutmaximumextractionrateofsteviawereobtained,wherethesolid-liquidratioandthecellulaseenzymeconcentrationwere1:10and0.2%respectively,atthetemperature50CandunderpH=5for90mins.Theextractionrateofsteviosideundertheoptimalconditionswas13.98%,whichwas1.94%higherthanbefore.

【期刊名称】《南昌大学学报（理科版）》【年(卷)，期】2012(036)001【总页数】4页(P69-72)【关键词】甜菊糖苷;纤维素酶;提取;工艺;正交试验【作者】丰雪;付娟娟;温辉梁

【作者单位】南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌330047;南昌大学食品科学与技术国家重点实验室，江西南昌330047【正文语种】中文

【中图分类】TS245.9

甜菊糖苷是从菊科草本植物甜叶菊中精提的新型甜味剂。它是一种无热量的食品甜味剂［1-3］，兼有降低血压、促进代谢、治疗胃酸过多等作用［4-7］。

纤维素酶具有极高的活性和高度专一性，可在常温、常压和温和的酸碱条件下，高效地进行催化反应［8-10］。目前，提取甜菊糖苷的主要方法有热水浸提法

［11］，超声提取法［12］,超临界萃取法［13］等。甜菊叶在高温蒸煮过程和超声中会产生多种类型的杂质，如蛋白质、果胶、鞣质等，会影响甜菊糖苷的析出，并给分离带来困难；超临界萃取可以得到纯度较高的甜菊糖苷，但要求实验条件较高且产率较低。纤维素酶可以破坏细胞壁结构，从而可以使叶片中的甜菊糖苷在较低的温度下溶于溶剂中［14-16］。本工作拟采用单因素和正交2种试验方法来研究纤维素酶对甜菊糖苷提取率的影响。

TU-1900紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）；SHZ-B型循环水真空泵（郑州杜甫仪器厂）；DHG-9140型电热恒温鼓风干燥箱（上海一恒科技有限公司）。

甜叶菊（江西赣县的甜叶菊干叶）；甜菊糖苷纯品（江西赣州菊隆高科技实业有限公司，纯度97%）；纤维素酶（酶活力u/g15000.0），氧化钙，硫酸铝钾，浓硫酸，乙酸，蒽酮等（上海国药集团）试验中所用试剂均为分析纯。

1.2.1甜菊叶的预处理将甜菊叶粉碎过80目筛，取30g干燥至恒重的粉末于烧杯中，加入一定量水、适量纤维素酶，置于一定温度的水浴锅中水浴加热一定时间，过滤，残渣加水和纤维素酶再提取1次，合并滤液。滤液加入一定量的氧化钙和硫酸铝钾除杂，得粗提液。

1.2.2甜菊糖苷提取的工艺优化选取料液比、纤维素酶添加量、提取时间、提取温度、提取液pH值5个因素，在单因素实验基础上，采用L9(43)正交实验［17-18］优化甜菊糖苷的提取工艺。

1.2.3标准曲线的制作准确称取50°C真空干燥至恒重的甜菊糖苷纯品0.1g于平底烧瓶中，加入30mL水溶解，加入质量浓度10%的硫酸20mL,混匀，100C水浴1.5h,冷却后过滤于100mL的容量瓶中，将平底烧瓶和滤纸洗3~4次，定容摇匀倒入小烧杯中。从里面取1,2,3,4,5,6mL溶液于100