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仪器分析实验指导

实验紫外-可见分光光度计波长校正

一、实验目的

学习紫外可见分光光度法的基本原理；了解紫外可见分光光度计的基本结构及其使用方法；掌握校正光度计波长的原理及方法，练习常用分光光度计的操作。

二、基本原理

波长读数与单色器色散后出射的单色光波长是否一致，对测量结果的正确性有密切关系。仪器在长期使用或搬动后，要经常检查波长的准确性。一般来说，分光光度计在不同波段对波长的准确性的要求大致如下：

波长允许误差

420≤±1nm

420~500≤±2nm

500~620≤±3nm

700≤±5nm

在一定条件下，物质一定，其峰值波长也一定。故，可测绘吸收光谱，找出峰值波长，实际测出的峰值波长与该物质的理论峰值波长之差即为该仪器波长的误差。

三、主要仪器与试剂

紫外可见分光光度计（UV-2000型），双光束紫外可见分光光度计（SP1901），分子荧光分光光度计（960CRT，970CRT）。

能用于校正波长的基准物质有：

K2CrO4最大吸收波长275nm；372nm介质0.05mol.L-1KOH

KMn