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、痰液及下呼吸道分泌物培养标准操作流程
1观察标本合格后操作。一般为晨痰，再留取痰之前刷牙、反复漱口，应从气管深
部咳出痰，吐进无菌容器内送检。涂片白细胞小于10，上皮细胞大于25为不合格
痰，相反白细胞大于25，上皮细胞小于10-25为合格痰标本。
2点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3接种环灭菌—待冷却后—取痰液—接种到血平板、中国兰平板（或麦康凯平板
上）。
平板划线分离培养：
（1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用
接种环划线。
（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域得划
线应接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
（3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养18-24小
时。
4观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还就是杆菌后鉴定种属。
5做药敏试验报告结果。
便培养标准操作流程
1、收取有粘液或脓血、稀水粪便标本。
2、点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3、接种环灭菌—待冷却后—取粪便—接种到血平板、SS平板、中国兰平板（或
麦康凯平板上）。
平板划线分离培养：
（1）用接种环将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用
接种环划线。
（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域得划
线应接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
（3）划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养。
4培养18-24小时后观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还就
是杆菌后鉴定种属。
5做药敏试验报告结果。
尿培养标准操作流程
1收取晨尿第一泡清洁中段尿。（把外阴用肥皂清洗一遍，再用清水清洗两遍，待干
或用干净布擦干）用导尿管得病号需新换导尿管后取标本
2点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3接种环灭菌—待冷却后将标本混匀，用定量接种环取尿液1ul(大约一接种环）—
接种到血平板，接种环灭菌待冷后取标本接种到中国兰平板（或麦康凯平板
上）。(抗菌素治疗患者应增加一个10ul接种。)
4平板单区划线法：用灭菌接种环在血平板与中国兰（或麦康凯）平板得中间位置
单区划线（这种方法适合菌落计数，假如细菌多不容易分出单个菌落。）
5划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养18-24小时。
6观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还就是杆菌后鉴定种属。
7做药敏试验报告结果。
注：接种1ul尿量者，菌落数乘以10，接种10ul尿量者，菌落数乘以100、即为
每ml尿液中所含有得细菌数（CFU/ml）,如菌落数生长过多无法计数则报告大于
100000CFU/ml、
分泌物培养标准操作流程
1在无菌环境下用一次性拭子快速取分泌物或脓液标本。
2点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
平板划线分离培养：
（1）用拭子将标本涂布在平板第一区域并作数次划线，在第二三区依次用接种环
划线。
（2）每划一区域应将接种环烧灼一次，冷却后再划下一区域，每一区域得划线应
接触上一区域得接种线2-3次使菌量逐渐减少以形成单个菌落。
（3划线完毕将平板加盖倒置（琼脂平板得底部向上）于35°C培养18-24小时。
3观察菌落特征涂片染色，确定阳性菌、阴性菌、球菌还就是杆菌后鉴定种属。
4做药敏试验——报告结果。
穿刺液培养标准操作流程
1收取合格得穿刺液标本。（咨询下就是否按要求取得标本）
2点燃酒精灯，尽量保证无菌中间。
3将穿刺液接种到增菌培养液进行培养。（穿刺液含细菌数量较少，因此，必须做增
菌培养）
4培养18-24小时候后，用酒精消毒培养液瓶口，用五毫升注射器抽取0、5毫升液
体打入血平板、巧克力平板（CO2环境中以分离嗜血杆菌）中国兰平板（或麦
康凯平板上）
接种环灭菌
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