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发酵液特点:含水多、产物含量低、粘度大、成分复杂
预处理包括:①发酵液杂质去除
②改善培养液处理能力
杂质中对提取影响最大的是高价无机离子和杂蛋白
预处理
高价无机离子的去除
Ca2+草酸
Mg2+三聚磷酸钠
Fe3+黄血盐(普鲁士蓝)
蛋白质去除
加热
调pH(无机酸或碱)
有机溶剂
蛋白沉淀剂
絮凝:某些高分子絮凝剂存在下,基于架桥作用,使胶粒形成粗大的絮凝团的作用
凝聚:在中性盐的作用下,由于双电层排斥电位的降低,而使胶体体系不稳定现象
常用絮凝剂:化学结构上分为三类高聚物、无机盐、有机化合物和表面活性剂
人工高分子聚合物:聚丙烯酰胺、聚苯乙烯,聚乙稀亚胺的衍生物
无机高分子聚合物:聚合铝盐、聚合铁盐
天然有机高分子絮凝剂:壳聚糖、葡聚糖、明胶、骨胶
微生物絮凝剂:糖蛋白,粘多糖,纤维素,核酸
影响絮凝剂的因素
絮凝剂的加量
絮凝剂的分子量
溶液的pH
搅拌速度
搅拌时间
絮凝剂应用优化
用量控制
pH控制.
固体浓度与粒子尺寸分布。
电解质含量。
后续工艺要求
混凝
先加入无机电解质,使悬浮粒子间的相互排斥能降低,脱稳而凝聚成微粒,然后,再加入絮凝剂。无机电解质的凝聚作用为高分子絮凝剂的架桥创造了良好的条件,从而,提高了絮凝效果。这种包括凝聚和絮凝机理的过程,常称为混凝
错流过滤:在泵的推动下料液平行于过滤面流动,与死端过滤不同的是料液流经膜面时产生的剪切力把膜面上滞留的颗粒带走,从而使污染层保持在一个较薄的水平。
特点a介质阻力大b不得到干滤饼c需要大的膜面积d收率高e质量好f减少处理步骤
在过滤操作中,为了降低过滤阻力,增加过滤速率或得到更澄清的滤液所加入的辅助性的粉粒状物质,称为助滤剂
膨胀床技术:兼有固定床和流化床的优点。流化的固相介质基本可以悬浮在床内的固定位置,流体流动状态流经床层.集料液澄清,目标产物浓缩和分离纯化为一体的生物集成分离技术.
泡载分离技术:泡载分离是通过鼓泡使细胞或溶质聚集在气液界面,借助浮力上升至溶液主体上方形成富集层,以达到分离,浓缩溶质和净化液相主体的目的,特别适于低浓度产物的富集。
泡载、气浮分离有2种形式
.形成较大气泡,目标物质附着在气泡上上浮
.先向料液中加入絮凝剂产生絮凝,然后从底部通过气体分配头放出大量微细气泡,这些小气泡在上浮过程中碰到絮凝体并吸附其上,使其上浮到液体表面
气浮法的关键在于微气泡的产生
反胶束:如果在非极性的有机溶剂中,表面活性剂的浓度达到一定程度,表面活性剂也会聚集在一起成聚集体,称为反胶束,是透明的、热力学稳定的系统。表面活性剂是反胶束溶液形成的关键
超临界流体SCF或SC:是指高过物质本身的临界温度和临界压力状态时的流体。
超临界流体既有液体对溶质有较大溶解度的特点,又具有气体易于扩散和运动,传质速率快的特点。
超临界萃取的特点
⑴萃取时间短:由于超临界流体强穿透力和高溶解度,它能快速地将提取物从载体中萃出。
(2)萃取彻底
⑶溶剂回收简单无残留,无三废产生。
(4)条件温和:在较低温度下萃取。
(5)萃取剂的溶解能力易于通过调节温度和压力控制。
(6)节省能源,无需大量的蒸储浓缩等操作
固相微萃取(SPME)是二十世纪九十年代初提出并发展起来的快速、灵敏、方便、无溶剂、易于实现自动化并适用于气体、液体和固体样品分析的新颖技术
主要由两部分组成:
一是由1cm长的融熔石英纤维和涂在其表面的色谱固定液或吸附剂构成的萃取头。
二是控制杆。测定时旋转控制杆,推出萃取头,浸于样品中或置于样品上空进行萃取,待吸附达到平衡后,将萃取头收纳于鞘内,进入气相色谱仪汽化室,再推出萃取头,热解吸后靠流动相将其导入,完成提取、分离、浓缩、测定
固相萃取的一般操作程序如下
.活化吸附剂
.上样
.脱附
SPME有三种基本的萃取模式:
直接萃取:涂有智取固定相的石英纤维被直接插入到样品基质中,目标组分直接从样品基质中转移到萃取固定相中
顶空萃取:1、被分析组分从液相中先扩散到气相中;2、被分析组分从气相转移到萃取固定相中
膜保护萃取:是通过一个选择性的膜将.样品与萃取头隔离,膜允许分析物通过而阻塞干扰物。可实现样品的粗分离,增加选择性,还可保护萃取头,防止被基质污染
优点:在无溶剂条件下可一步完成取样、萃取和浓缩,与气相色谱、高效液相色谱等仪器联用;
可以快速有效的分析样品中痕量有机物;
重现性好、操作简便、易于实现自动化;
检出限达ug/L;
克服了传统的液液萃取、索氏萃取等具有大量使用有机溶剂和样品处理时间长、难用于挥发性有机物的分析等缺点
气相色谱
原理气相色谱法系采用气体为流动相(载气)流经装有固定相的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后,被载气带入色谱柱进行分离,各组分先后进入检测器,记录并形成色谱信号。
特点
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