紫外可见分析法.pptVIP

*2．标准曲线法配制一系列浓度不同的标准溶液，在一定波长下分别测定吸光度A。以A为纵坐标，浓度c为横坐标，绘制A-c标准曲线。完全相同的条件下，测定被测溶液的吸光度，并从标准曲线上找出对应的被测溶液浓度或含量。BlankStandardSampleSample二、定量分析第55页,共77页，2024年2月25日，星期天*示例芦丁含量测定0.710mg/25mL第56页,共77页，2024年2月25日，星期天*3．对照法相同条件下配制样品溶液和标准溶液，在同一波长处测二者吸光度例：精密吸取B12注射液2.50mL，加水稀释至10.00mL；另配制对照液，精密称定对照品25.00mg，加水稀释至1000mL。在361nm处，用1cm吸收池，分别测定吸光度为0.508和0.518，求B12注射液注射液的浓度？二、定量分析第57页,共77页，2024年2月25日，星期天*注：当样品溶液与标准品溶液的稀释倍数相同时第58页,共77页，2024年2月25日，星期天*（二）多组分的定量方法三种情况：1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰）2．两组分吸收光谱部分重叠3.两组分吸收光谱完全重叠二、定量分析第59页,共77页，2024年2月25日，星期天*1．两组分吸收光谱不重叠（互不干扰）两组分在各自λmax下测定→分别按单组分定量二、定量分析第60页,共77页，2024年2月25日，星期天*2．两组分吸收光谱部分重叠λ1→测A1→b组分不干扰→可按单组分定量测caλ2→测A2→a组分干扰→不能按单组分定量测cb定量Ca定量Cb二、定量分析第61页,共77页，2024年2月25日，星期天*3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定（1）解线性方程组法二、定量分析第62页,共77页，2024年2月25日，星期天*（2）等吸收双波长法测定a，消除b的影响步骤：1.选择λ1和λ2对于干扰组分b，λ1和λ2是等吸收波长；对于a，两波长的吸光度之差足够大；3．两组分吸收光谱完全重叠——混合样品测定二、定量分析第63页,共77页，2024年2月25日，星期天*步骤2.a的对照品溶液在λ1和λ2处测定吸光度，得二、定量分析b的对照品溶液在λ1和λ2处测定吸光度，得样品溶液在λ1和λ2处测定吸光度，得E1a和E2a第64页,共77页，2024年2月25日，星期天*二、定量分析第65页,共77页，2024年2月25日，星期天*同理消除a的影响，测b二、定量分析第66页,共77页，2024年2月25日，星期天*（一）有机物的紫外吸收光谱从紫外吸收光谱推断：a.分子骨架b.发色团之间的共轭关系c.取代基的种类、位置和数目1.饱和碳氢化合物跃迁类型：σ→σ*,需很大能量吸收峰位置：远紫外区，200～400nm无吸收三、结构分析第67页,共77页，2024年2月25日，星期天*2.含孤立助色团和生色团的有机化合物1）含有孤立助色团电子类型：σ和n电子跃迁类型：n→σ*2）含有孤立生色团电子类型：σπ和n电子跃迁类型：n→σ*(190nm)π→π*（150-180nm）n→π*(275-295nm)3.共轭烯烃两个双键只隔一个单键成共轭大π键跃迁类型及吸收峰位置：π→π*较孤立双键能级差减少，吸收长移三、结构分析第68页,共77页，2024年2月25日，星期天*4.αβ-不饱和醛、酮、酸、酯1）分子特点：C=O与C=C共轭2）跃迁类型及吸收峰位置：π→π*200～260nmε约10000n→π*310～350nmε1003）一般溶剂极性增加使π→π*吸收红移（长移）使n→π*吸收蓝移（短移）三、结构分析第69页,共77页，2024年2月25日，星期天*5.芳香族化合物（1）苯和取代苯分子特点：环状共轭体系跃迁类型和吸收峰位置：π→π*E1，E2，B三个吸收带，