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方法1:荧光分光光度法
原理:荧光分光光度法,试样中的维生素B1经稀酸以及消化酶分解,吸附剂的吸附分离提纯后,在碱性条件下被铁氰化钾氧化生成荧光色素-硫色素,用正丁醇萃取。硫色素在正丁醇中的荧光强度与试样中维生素B1的含量成正比,依此进行定量测定.
产品清单
水
应满足GB/T6682中三级水的要求
盐酸
分析纯
硫酸
分析纯
乙酸钠
分析纯
淀粉酶
淀粉酶制剂
氯化钾
分析纯
盐酸
浓盐酸
氢氧化钠
分析纯
铁氰化钾
分析纯
水
色谱用水,应满足GB/T6682中一级水的要求
乙酸
冰乙酸
乙醇
无水乙醇
沸石
人造沸石,0.25mm-0.18mm(60目-80目)
烧杯
-
玻璃棒
-
布氏漏斗
-
维生素B1
硝酸硫胺素,标准品,ThiamineNitrate,C12H17N5O4S,532-43-4,纯度大于99%
五氧化二磷
-
干燥器
-
冰箱
2℃-8℃
试剂瓶
棕色瓶
硫酸奎宁
C40H50N4O8S,804-63-7
正丁醇
荧光强度不超过硫酸奎宁工作液
天平
分析天平,感量0.0001g,0.001g
反应釜
高压釜,使用温度为121℃-123℃或压力达到15kg/cm3
恒温箱
电热恒温箱45℃-50℃
层析柱
吸附分离柱,全长235mm,外径×长度如下:上端贮液槽尺寸为35mm×70mm,容量约为50mL.中部吸附管8mmX130mm,下端35mm拉成毛细管
离心管
具塞25mL
分光光度计
荧光分光光度计,备1cm石英比色杯
注射器
10mL
蒸馏装置
全玻璃蒸馏器
锥形瓶
100mL棕色
滤纸
无灰
烧杯
50mL
脱脂棉
-
玻璃棒
-
样品筛
0.425mm孔径筛
容量瓶
25ml
方法2:高效液相色谱法
原理:试样经酸性提取液超声提取后,将过滤离心后的试液注入高效液相色谱仪反相色谱系统中进行分离.用紫外(或二极管矩阵检测器)检测.外标法计算维生素B1的含量。
产品清单
水
符合GB/T6682中一级用水规定
氯化铵
优级纯
庚烷磺酸钠
PICB7,优级纯
乙酸
冰乙酸,优级纯
三乙胺
色谱纯
甲醇
色谱纯
乙醇
分析纯
乙二胺四乙酸二钠二水合物
C10H14N2Na2O8·2H2O,CAS:6381-92-6
容量瓶
1000mL
水
去离子水
滤膜
0.45μm
冰箱
2℃-8℃
酸度计
pH计,带温控,精准至0.01
超声波清洗器
超声波提取器
过滤器
针头过滤器备0.45um(或0.2um)滤膜
液相色谱仪
高效液相色谱仪带紫外或二极管矩阵检测器
容量瓶
100mL棕色
离心机
8000r/min
液相色谱柱
C18柱,长250mm,内径4.6mm,粒度5um
容量瓶
50ml
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