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临床医学检验临床免疫技术：酶免疫技术考点巩固

1、单选?ELISA板包被后，最常用的封闭物质是（）

A.人白蛋白

B.人球蛋白

C.牛血清白蛋白

D.牛血清球蛋白

E.鼠白蛋白

正确答案：C

参考解析：将抗原或抗体固相化的过程（江南博哥）称为包被。由于载体的不同，包被的方法也不同。如以聚苯乙烯ELISA板为载体，通常将抗原或抗体溶于缓冲液（最常用的为pH9.6的碳酸缓冲液）中，加于ELISA板孔中在4℃过夜，经清洗后即可应用。如果包被液中的蛋白质浓度过低，固相载体表面有能被此蛋白质完全覆盖，其后加入的血清标本和酶结合物中的蛋白质也会部分地吸附于固相载体表面，最后产生非特异性显色而导致本底偏高。在这种情况下，如在包被后再用1％～5％牛血清白蛋白包被一次，可以消除这种干扰。这一过程称为封闭。包被好的ELISA板在低温可放置一段时间而不失去其免疫活性。考点：免疫吸附剂

2、单选?关于斑点-ELISA说法哪一项不正确（）

A.以吸附蛋白能力很强的硝酸纤维膜为载体

B.底物经酶反应后形成有色沉淀，使固相膜染色

C.斑点-ELISA灵敏度高，测得效价常高于常规ELISA

D.操作简便

E.斑点-ELISA可同时获得对多种疾病的诊断结果

正确答案：C

参考解析：斑点-ELISA的原理与常规ELISA相同，不同之处在于斑点-ELISA采用的固相载体为对蛋白质具有很强吸附力的硝酸纤维素膜，故检测灵敏度高，是普通ELISA的6～8倍。如果膜上同定多种抗原，可同时检测多种抗体。

3、单选?酶扩大免疫测定技术是最早取得实际应用的何种酶免疫测定方法（）

A.均相酶免疫测定

B.异相酶免疫测定

C.固相酶免疫测定

D.液相酶免疫测定

E.固相－液相酶免疫测定

正确答案：A

4、单选?下列哪项不是血药浓度免疫学测定的技术（）

A.化学发光免疫测定

B.免疫电泳法

C.放射免疫法

D.荧光免疫法

E.酶免疫法

正确答案：B

参考解析：药物多数分子量很小，为半抗原。免疫电泳的方法不够灵敏，不适于测定半抗原。

5、单选?用ELISA双抗体夹心法检测抗原A时，固相载体的包被物是（）

A.酶标记A抗体

B.未标记的抗A抗体

C.未标记抗原A

D.酶标抗球蛋白抗体

E.酶标记抗原A

正确答案：B

参考解析：ELISA法中双抗体夹心法的固相载体包被物是未标记的抗待测抗原的抗体。

6、单选?在双位点ELISA实验时，造成抗原测值低于实际含量的常见原因是（）

A.固相抗体过多

B.反应时间不够

C.标记抗体过多

D.待测物过浓

E.酶的活性过高

正确答案：D

参考解析：钩状效应是指由于抗原抗体比例不合适而导致假阴性的现象，其中抗体过量叫做前带效应，抗原过量叫做后带效应。抗原抗体特异性反应时，生成结合物的量与反应物的浓度有关。无论在一定量的抗体中加入不同量的抗原或在一定量的抗原中加入不同量的抗体，均可发现只有在两者分子比例合适时才出现最强的抗原一抗体反应。

7、单选?酶联免疫吸附试验（ELISA）中应用最多的底物是（）

A.邻苯二胺（OPD.

B.四甲基联苯胺（TMB.

C.ABTS

D.对硝基苯磷酸酯（p-NPP）

E.以上都不是

正确答案：B

参考解析：邻苯二胺灵敏度高，比色方便，是ELISA中应用最早的底物，但稳定性差，反应过程需要避光，还具有致癌性；四甲基联苯胺稳定性好，反应无需避光，没有致突变作用，是目前应用最广泛的底物，但是水溶性差。

8、单选?ELISA试验中将HRP酶结合到抗原或抗体的方法是（）

A.凝胶过滤

B.离子交换层析

C.亲和层析

D.戊二醛交联

E.共价结合

正确答案：D

9、单选?ABC法中的桥是指（）

A.生物素

B.亲和素

C.生物素化的抗体

D.与生物素结合的酶

E.三抗

正确答案：B

10、单选?患者HBsAg（+）、HBeAg（+）、抗－Hbe（－）、抗－HBcIgM（+）、抗－HBs（－），正确的判断是（）

A.急性乙型肝炎

B.慢性乙型肝炎

C.慢性迁延性肝炎

D.乙肝恢复期

E.慢性活动性肝炎

正确答案：A

11、单选?均相酶免疫测定的优点不包括（）

A.多用于小分子激素和半抗原的测定

B.勿需分离游离的酶标抗原

C.易于自动化分析

D.不易受样品中非特异的内源酶的干扰

E.灵敏度可达10－9mol／L

正确答案：D

12、单选?酶标板用抗原包被后要进行封闭的主要原因是（）

A.使抗原固化到聚苯乙烯板上

B.增加酶标板的稳定性

C.保护包被抗原的免疫活性

D.防止非特异反应

E.使酶的工作浓度最佳

正确答案：D

13、单选?关于ELISA的固相载体论述有误的是（）

A.最常用的是聚苯乙烯微量反应板

B.每一批号的聚苯乙烯在使用前需检查其性能

C.聚氯乙烯对蛋白质的吸附性能比聚苯乙烯低

D.阳性和阴性标本测定结果差别最大者是最适用