生化物质的测定方法.ppt

方法特点：简单迅速、干扰少、灵敏度高（1ug）广泛用于各种蛋白质样品的测定第63页,共66页，2024年2月25日，星期天水扬酸比色法蛋白质经浓H2SO4消化而转化在铵盐溶液后，在一定的酸度和温度条件下可与水扬酸钠和次氯酸钠作用生成蓝色化合物，在660nm处比色测定。该方法比较适合于谷物类和饲料样品的蛋白质含量测定第64页,共66页，2024年2月25日，星期天红外光谱法原理：根据蛋白质在近红外光（750-3000nm）区域具有特定光吸收和反射的特性。第65页,共66页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第66页,共66页，2024年2月25日，星期天当放射性物质进入了体内，对机体造成内照射的情形下，α射线由于射程很短，其危害性大于β射线和γ射线的危害，而β射线的内照射危害又大于γ射线。放射防护的必要性在于保护操作者本人免受辐射损伤，防止了必要的射线照射，保护周围人群的健康和安全，做好放射性污物、污水的收集与处理，避免环境污染，保证实验能够正常进行，取得的结果可靠。第31页,共66页，2024年2月25日，星期天放射防护的三原则1.放射实践的正当化

在进行任何放射性工作时，都应当代价和利益的分析，要求任何放射实践，对人群和环境可能产生的危害比起个人和社会从中获得的利益来，应当是很小的，即效益明显大于付出的全部代价时，所进行的放射性工作就是正当的，是值得进行的。第32页,共66页，2024年2月25日，星期天2.放射防护的最优化

使放射性和照射量在可以合理达到的尽可能低的水平，避免一些不必要的照射，要求对放射实践选择防护水平时，必须在由放射实践带来的利益与所付出和健康损害的代价之间权衡利蔽，以期用最小的代价获取最大的净利益。第33页,共66页，2024年2月25日，星期天个人剂量限制

在放射实践中，不产生过高的个体照射量，保证任何人的危险度不超过某一数值，即必须保证个人所受的放射性剂量不超过规定的相应限值。规定工作人员全身均匀照射的年剂量当量限制为50毫希沃特*（mSv），当长期持续受放射性照射时，公众中个人在一生中每年全身受照射的年剂量当量限值不应高于1mSv(0.1rem)，且以上这些限制不包括天然本底照射和医疗照射。第34页,共66页，2024年2月25日，星期天同位素示踪法基本原理和特点同位素示踪所利用的放射性核素（或稳定性核素）及它们的化合物，与自然界存在的相应普通元素及其化合物之间的化学性质和生物学性质是相同的，只是具有不同的核物理性质。因此，就可以用同位素作为一种标记，制成含有同位素的标记化合物（如标记食物，药物和代谢物质等）代替相应的非标记化合物。利用放射性同位素不断地放出特征射线的核物理性质，就可以用核探测器随时追踪它在体内或体外的位置、数量及其转变等第35页,共66页，2024年2月25日，星期天1.灵敏度高

放射性示踪法可测到10-14－10-18克水平2.方法简便

放射性测定不受其它非放射性物质的干扰，可以省略许多复杂的物质分离步骤3.定位定量准确4.符合生理条件第36页,共66页，2024年2月25日，星期天放射性同位素测量方法的选择.测量方法的选择取决于射线种类对于α射线通常可用硫化锌晶体、电离室、核乳胶等方法探测；对能量高的β射线可用云母窗计数管、塑料闪烁晶体及核乳胶测定，对于能量低的β射线可用液体闪烁计数器测量：对于γ射线则用G-M计数管，碘化钠（铊）闪烁晶体探测。目前大多数实验室主要采用晶体闪烁计数法和液体闪烁计数法两种测量方式第37页,共66页，2024年2月25日，星期天7-4一些特定生化物质的分析检测

蛋白质的分析与检测方法凯氏(Kjedahl)定氮法FOLIN-酚法双缩脲法紫外分光光度法染料结合法水扬酸比色法其他折光法、旋光法、近红外法谱法。第38页,共66页，2024年2月25日，星期天凯氏(Kjedahl)定氮法凯氏定氮法可用于所有样品中蛋白质含量测定，因样品中常含有核酸，生物碱，含N类脂、卟啉以及含N色素等非蛋白质的含N化合物，故结果称为粗蛋白含量。凯氏定N法：始于1833年，现有常量法、微量法、自动定氮仪法、半微量法、改良凯氏法。第39页,共66页，2024年2月25日，星期天原理：样品蛋白质含量=样品蛋白质系数*样品N含量样品与浓H2SO4和催化剂一同加热消化，使样品中的蛋白质分解，其中C和H被氧化为CO2逸出，而样品的有机N转化为NH3与H2SO4结合为（NH4）S2O，然后加碱蒸馏，使NH3蒸出，用硼酸吸收后再以标准盐酸滴定，根据标准酸消耗量