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自体NK细胞诱导活化培养方法及放行规范

1范围

本文件规定了自体NK细胞的基本要求、培养方法、细胞放行标准、安全管理、记录和报告。

本文件适用于自体NK细胞诱导活化培养计放行。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB3095环境空气质量标准

GB19489实验室生物安全通用要求

GB50073洁净厂房设计规范

GB50346生物安全实验室建筑技术规范

GB50591洁净室施工及验收规范

3术语和定义

下列术语和定义适用于本文件。

自体NK细胞autologousnaturalkillercell

从患者自身提取并用于治疗的自然杀伤细胞，在体外经过扩增和激活后，可以回输给患者，以增强

免疫力、对抗肿瘤细胞或清除病毒感染细胞。

台盼蓝trypanblue

细胞活性染料，常用于检测细胞膜的完整性，检测细胞是否存活。

注：活细胞因细胞膜结构完整会排斥台盼蓝，而丧失活性或者细胞膜结构不完整的细胞则会被台盼蓝染成淡蓝色。

4基本要求

场地与设施

4.1.1自体NK细胞的培养机构场地应符合《药品生产质量管理规范》要求，空气质量标准应符合GB

3095标准分级二级标准。

4.1.2自体NK细胞的培养机构实验室应由具有洁净实验室设计建设资质的工程公司设计与建造，并

应符合GB19489、GB50073、GB50346和GB50591的规定。建设完成后，各功能区域的洁净级别应由

专业机构进行检测并出具合格证明。

4.1.3功能区应按自体NK细胞的培养工艺进行各区域设计，符合《药品生产质量管理规范》要求。培

养机构应配备独立质量检测实验室，并符合GB19489和GB50346的规定。

设备和耗材

4.2.1自体NK细胞的培养机构应优先选用符合《药品生产质量管理规范》的要求，并获得国家资质认

证的设备、仪器、耗材和试剂。

1

4.2.2自体NK细胞的培养机构应对设备、仪器、耗材和试剂供应商进行资质审核认证，要求供应商提

供产品质量报告和批次检验报告，并对耗材及试剂进行质量抽检，避免采购质量不合格的产品。

4.2.3自体NK细胞的培养机构设备和仪器正式使用前应做安装确认(IQ)、运行确认（OQ）和性能确认

(PQ)，并定期进行第三方校准，不得使用有安全隐患的仪器操作样本及细胞制品。

4.2.4自体NK细胞的培养机构应对设备与仪器进行编号建档，并建立标准操作流程(SOP)，确保使用、

运行、保养、维修记录完整可追溯，对于关键工艺相关设备参数应进行实时监测，及时对状态异常的设

备进行校对和维修。

人员管理

4.3.1自体NK细胞的培养机构应分别设立细胞培养负责人、质量管理负责人和质量授权人岗位。由法

人授权任命，任职资质应符合《药品生产质量管理规范》要求，定期接受岗位专业培训，培养技术负责

人与质量管理负责人、质量授权人不得相互兼任。

4.3.2自体NK细胞的培养和质控技术人员应具备的健康要求：HAV、HBV、HCV、HIV及梅毒的抗体检

测应为阴性，并且(矫正)视力正常，无色盲、色弱。

4.3.3自体NK细胞的培养和质控技术人员应半年接受体检一次，有呼吸道感染或发热等疾病状态下

不得进入洁净操作区，需完全康复后方可恢复岗位操作。

4.3.4自体NK细胞的培养和质控技术人员上岗前应经过专业培训，内容包括但不限于干细胞理论与

实践、生命伦理、干细胞法律法规、GMP管理、GCP资质、制剂基本知识、细胞培养基础、生物安全、

仪器设备使用与维护方法、物料管理与清洁卫生、岗位职责、操作规范等内容。

5培养方法

细胞采集与预处理

5.1.1明确细胞的来源，确保来源合法、合规，并符合伦理标准。

5.1.2明确供体健康状况，进行传染性疾病因子筛查与检测（包括HIV、HBV、HCV、梅毒、HTLV、EBV

与CMV）。

5.1.3采集场所应达到Ⅲ级洁净手术室要求。

5.1.4采集人员应具有医师职业证，且经过相应的技术培训。

5.1.