原核基因表达调控模式.ppt

细菌通过弱化作用弥补阻遏作用的不足，因为阻遏作用只能使转录不起始，对于已经起始的转录，只能通过弱化作用使之中途停下来。阻遏作用的信号是细胞内色氨酸的多少；弱化作用的信号则是细胞内载有色氨酸的tRNA的多少。它通过前导肽的翻译来控制转录的进行，在细菌细胞内这两种作用相辅相成，体现着生物体内周密的调控作用。第62页,共90页，2024年2月25日，星期天什么是操纵子（operon)?试说明色氨酸操纵子（Trpoperon)在原核基因表达调控中的调控机制和重要作用。2003年武汉大学分子生物学试题第63页,共90页，2024年2月25日，星期天第五节其他操纵子一、半乳糖操纵子(galactoseoperon)异构酶(galE)乳糖-磷酸尿嘧啶核苷转移酶(galT)

半乳糖激酶(galk)。第64页,共90页，2024年2月25日，星期天gal操纵子的特点：①它有两个启动子，其mRNA可从两个不同的起始点开始转录；②它有两个O区，一个在P区上游，另一个在结构基因galE内部。第65页,共90页，2024年2月25日，星期天二、阿拉伯糖操纵子（arabinoseoperon)araB基因、araA基因和araD,形成一个基因簇，简写为araBAD三个基因的表达受到ara操纵子中araC基因产物AraC蛋白的调控。第66页,共90页，2024年2月25日，星期天ara操纵子的调控有两个特点：第一，araC表达受到AraC的自身调控。第二，AraC既是ara操纵子的正调节蛋白（需cAMP-CRP的共同参与，起始转录），又是其负调节蛋白。这种双重功能是通过AraC蛋白的两种异构体来实现的（Pi和Pr)。第67页,共90页，2024年2月25日，星期天第68页,共90页，2024年2月25日，星期天第69页,共90页，2024年2月25日，星期天第70页,共90页，2024年2月25日，星期天三、阻遏蛋白LexA的降解与细菌中的SOS应答SOS反应的机理：由RecA蛋白和LexA阻遏物的相互作用引起的。LexA阻遏物：是SOSDNA修复系统所有基因的阻遏物RecA蛋白：是SOS反应的最初的发动因子。在单链DNA和ATP存在时，RecA蛋白被激活，表现出水解酶活性，分解LexA阻遏物。当RecA水解LexA阻遏物后，导致SOS体系（包括recA基因）高效表达，DNA得到修复第71页,共90页，2024年2月25日，星期天一、翻译起始的调控RBS（核糖体结合位点）：mRNA链上起始密码子AUG上游的一段非翻译区。在RBS中有SD序列，长度一般为5个核苷酸，富含嘌呤，该序列与核糖体16SrRNA的3’端互补配对，促使核糖体结合到mRNA上，有利于翻译开始。RBS的结合强度取决于SD序列的结构及其与起始密码子AUG之间的距离。SD—4~10（9）—AUG第六节转录后水平上的调控第72页,共90页，2024年2月25日，星期天二、稀有密码子对翻译的影响dnaG(引物酶)RNA引物dnaG、rpoD和rpsU属于大肠杆菌基因组上的同一个操纵子50个拷贝的dnaG蛋白、2800个拷贝的rpoD和40000个拷贝的rpsU第73页,共90页，2024年2月25日，星期天几种蛋白质中异亮氨酸密码子使用频率比较蛋白质AUU/%AUC%AUA%结构蛋白37621σ亚基26740DnaG蛋白363232细胞内对应于稀有密码子的tRNA较少，高频率使用这些密码子的基因翻译过程容易受阻，影响了蛋白质合成的总量。第74页,共90页，2024年2月25日，星期天三、重叠基因对翻译的影响第75页,共90页，2024年2月25日，星期天TrpB–谷氨酸-异亮氨酸-终止GAA--AUC--UGA--UGG--AAAUG--GAA甲硫氨酸–谷氨酸–trpAtrpE—苏氨酸—苯丙氨酸—终止ACU--UUC--UGA--UGG--CUAUGAUG–GCU甲硫氨酸--丙氨酸--trpD