动物细胞培养和核移植.ppt

灭活的病毒颗粒黏附于细胞表面细胞膜被病毒颗粒穿通细胞膜连接细胞融合，形成杂种细胞（细胞膜具有一定的流动性）第32页,共40页，2024年2月25日，星期天主要用于制备单克隆抗体获得杂种植株用途物理、化学方法灭活的病毒物理（离心、振荡、电刺激）化学（聚乙二醇）诱导方法使细胞分散后诱导细胞融合去除细胞壁后诱导原生质体融合细胞融合的方法细胞膜的流动性细胞膜的流动性、植物细胞全能性原理动物细胞融合植物体细胞杂交比较项目植物、动物细胞融合的比较第33页,共40页，2024年2月25日，星期天四、单克隆抗体单:单个细胞克隆:无性繁殖抗体:化学性质单一、特异性强第34页,共40页，2024年2月25日，星期天原始的方法获得抗体，特异性差，纯度低。想获得单一抗体，必须用单个B淋巴细胞进行无性繁殖，通过克隆形成细胞群。问题：体外培养的条件下，一个B淋巴细胞是不可能无限增值的，如何使单个淋巴细胞增殖呢？第35页,共40页，2024年2月25日，星期天抗体抗原刺激效应B细胞筛选单一效应B细胞增殖，产生大量抗体缺点：特异性差、纯度低；产量低、反应不够灵敏动物体内第36页,共40页，2024年2月25日，星期天设计方案：一个B淋巴细胞－－只分泌一种特异性抗体小鼠骨髓瘤细胞－－能无限增殖杂种细胞根据阿根廷科学家米尔斯坦和德国科学家柯勒设计的实验方案:1、单克隆抗体制备过程第37页,共40页，2024年2月25日，星期天第38页,共40页，2024年2月25日，星期天2、单克隆抗体的应用：①在基础理论研究中具有重要意义②在疾病诊断、治疗和预防方面，与常规抗体相比，具有产量高，特异性强，灵敏度高，优越性十分明显③作为载体，运载抗癌药物，制成生物导弹第39页,共40页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第40页,共40页，2024年2月25日，星期天******关于动物细胞培养和核移植离体植物器官、组织或细胞愈伤组织胚状体植物体脱（去）分化再分化（芽、根）植物细胞工程常用的技术手段有哪些？植物组织培养使用的培养基：固体有机物（蔗糖）植物激素第2页,共40页，2024年2月25日，星期天植物体细胞杂交植物细胞A植物细胞B去细胞壁原生质体融合杂种细胞愈伤组织杂种植株植物组织培养植物细胞融合1、植物体细胞杂交的结果是产生了？2、这个过程中涉及的原理是？杂种植株细胞膜的流动性、植物细胞的全能性第3页,共40页，2024年2月25日，星期天多莉克隆猴第4页,共40页，2024年2月25日，星期天动物细胞工程常用的技术手段动物细胞培养动物细胞融合单克隆抗体胚胎移植核移植第5页,共40页，2024年2月25日，星期天动物细胞培养就是从动物机体内取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，放在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。1、概念：一、动物细胞培养第6页,共40页，2024年2月25日，星期天放入二氧化碳培养箱中培养动物细胞培养过程示意图关键词:接触抑制细胞贴壁原代培养传代培养2、过程第7页,共40页，2024年2月25日，星期天幼龄动物取动物器官和组织剪碎组织胰蛋白酶处理细胞培养单个细胞第8页,共40页，2024年2月25日，星期天动物细胞生长特性：细胞贴壁悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上，称为细胞贴壁。要求：培养瓶或培养皿的内表面光滑、无毒、易于贴附。细胞的接触抑制当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的接触抑制。第9页,共40页，2024年2月25日，星期天原代培养(primaryculture)传代培养(subculture)动物组织消化后的初次培养。贴满瓶壁的细胞需要重新用胰蛋白酶等处理，然后分瓶继续培养，让细胞继续增殖，这样的培养过程称为传代培养。第10页,共40页，2024年2月25日，星期天接触抑制

(contactinhibition)细胞在贴壁生长过程中，随着细胞分裂，数量不断增加，最后形成一个单层，此时细胞间相互接触，细胞分裂和生长停止，数量不再增加。第11页,共40页，2024年2月25日，星期天N