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第8章

微生物遗传变异和育种

细菌基因重组-转化与转导

主讲人:魏新元

基因重组:指两种不同来源的遗传物质通过交

换和重新组合、形成新的基因型的的过程。

一、转化(transformation)

DNA片段

供体菌受体菌

1928年,Griffith发现肺炎链球菌(Streptococcuspneumoniae)

的转化现象,目前已知有许多种的细菌具有自然转化的能力。

转化:DNA分子

指同源或异源的游离(质粒和染色体DNA)

被自然或人工感受态细胞提取,并得到表达的水平方向的基因

转移过程。这些被转化的游离的DNA片段称为转化因子。转

化后的受体菌,称为转化子(transformant)。

进行转化,需要二方面必要的条件:

1)、建立了感受态的受体细胞

感受态细胞:

受体菌最容易接受外源DNA片段并实现转化的

生理状态称为感受态。

自然感受态的出现是细胞一定生长阶段的生理特性,受细菌

自身的基因控制;

人工感受态则是通过人为诱导的方法,使细胞具有摄取DNA

的能力,或人为地将DNA导入细胞内

2)、外源游离DNA分子(转化因子)

转化因子通常是双链DNA。

转化过程:

①感受态的出现②转化因子的吸附与掺入③转化因子的整合

转染(transfection):

噬菌体DNA被感受态细胞摄取并产生有活性的病毒颗粒

转染的特点:提纯的噬菌体DNA以转化的(而非感染)途径

进入细胞并表达后产生完整的病毒颗粒。

人工转化:

不是由细菌自身的基因所控制

用多种不同的技术处理受体细胞,使其人为地处于一

种可以摄取外源DNA的“人工感受态”。

用CaCl处理细胞,电穿孔等是常用的人工转化手段。

2

电穿孔法(electroporation):用高压脉冲电流击破细胞膜

形成小孔,使各种大分子(包括DNA)能通过这些小孔进

入细胞,所以又称电转化。

二、转导(transduction)

转导:由噬菌体介导的细菌细胞间进行遗传交换的一种

方式,一个细胞的DNA或RNA通过病毒载体的感染转

移到另一个细胞中。

转导噬菌体:能将细菌宿主的部分染色体和质粒DNA带

到另一个细菌的噬菌体。获得了由噬菌体携带来的供体

菌DNA片段的受体细胞称为转导子。在转导中被转移的

染色体片段称为转导因子。

普遍转导

细菌转导的类型:

局限转导

1、普遍转导(generalizedtransduction)

噬菌体可以转导供体菌染色体的任何部分到受体细胞中。

普遍性转导的三种后果:

被降解,转导失败。

进入受体的外源DNA通过与细胞染色体的重组

交换而形成稳定的转导子。

流产转导。

2、局限转导

噬菌体只能转导供体菌染色体的特定部分到受体细胞中。

整合到细菌染色体的特定位

温和噬菌体感染

点上宿主细胞发生溶源化

溶源菌因诱导而发生裂解时,

在前噬菌体二侧的少数宿主基

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